抗增殖蛋白在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中的表达及全反式维甲酸的干预

摘要

第一部分抗增殖蛋白在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中的表达和意义 目的：探讨抗增殖蛋白(Prohibitin，PHB)在单侧输尿管梗阻(unilateralureteral obstruction，UUO)大鼠肾脏组织中的表达和作用。 方法：48只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组，每组24只，模型组大鼠麻醉后，背侧切口行左侧输尿管结扎术，假手术组大鼠同样条件下只探及肾包膜。分别于造模后第7，14，21，28天每组各处死6只大鼠，HE和Masson染色行肾脏病理学检查并计算肾间质纤维化(renalinterstitial fibrosis，RIF)指数，应用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应法(reverse transcription reaction，RT-PCR)检测肾脏组织PHB、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)的蛋白及其mRNA表达；用免疫组织化学法检测肾脏组织IV型胶原(collagen-IV，Col-IV)和纤维连接蛋白(fibronectin，FN)的蛋白表达。 结果：(1)与假手术组大鼠相比，模型组大鼠各时间点：①病理学检查显示：肾小管上皮细胞萎缩，胶原纤维化形成，弥漫性单核细胞、淋巴细胞浸润，RIF指数显著增高(P<0.01)，梗阻时间越长，RIF指数越高；②肾脏组织PHB的蛋白及其mRNA表达均显著减少(P<0.01)，梗阻时间越长，表达越低；③肾脏组织TGF-β1的蛋白及其mRNA表达均显著增加(P＜0.01)，梗阻时间越长，表达越高；④肾脏组织Col-IV和FN的蛋白表达均显著增高(P＜0.01)，梗阻时间越长，表达越高。(2)相关性分析：模型组大鼠肾脏组织PHB的蛋白表达与RIF指数呈显著负相关(r=-0.825，P＜0.01)； TGF-β1、Col-IV和FN的蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r=0.995，0.977，0.969，P均＜0.01)；PHB的蛋白表达与TGF-β1、Col-IV和FN的蛋白表达均呈显著负相关(r=-0.786，-0.948，-0.953，P均＜0.01)。 结论 \：UUO所致RIF大鼠肾脏组织PHB的蛋白及其mRNA表达均显著降低，梗阻时间越长，PHB表达越低，RIF程度越重。PHB可能参与了RIF的发生发展，其机制可能与TGF-β1介导有关。 第二部分全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织抗增殖蛋白表达的影响 目的：探讨全反式维甲酸(all trans retinoic acid，ATRA)对UUO大鼠肾脏组织PHB表达的影响。 方法：72只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和ATRA组。术前1天，ATRA组大鼠行ATRA灌胃(15mg/kg.d)直至处死当天，模型组和假手术组大鼠给予等容量生理盐水灌胃。将模型组和ATRA组大鼠麻醉后背侧切口行左侧输尿管结扎术，假手术组大鼠同样条件下只探及肾包膜。分别于造模后第7，14，21，28天每组各处死6只大鼠，留取左侧肾脏，HE和Masson染色行肾脏病理学检查，并计算RIF指数。应用免疫组织化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测各组大鼠肾脏组织PHB、TGF-β1的蛋白及其mRNA表达；用免疫组织化学法检测肾脏组织Col-IV和FN的蛋白表达。 结果：与模型组大鼠各时间点相比，ATRA组大鼠肾间质纤维化程度较轻，肾脏病理学有明显改善，RIF指数显著下降(P<0.01)；肾脏组织PHB的蛋白及其mRNA表达均显著增高(P<0.01)；肾脏组织TGF-β1的蛋白及其mRNA表达均显著降低(P<0.01)；肾脏组织Col-IV和FN的蛋白表达均显著降低(P<0.01)。 结论：ATRA可能通过增加UUO大鼠肾脏组织PHB的蛋白及其mRNA表达，减少肾脏组织TGF-β1的蛋白及其mRNA表达，而达到抑制RIF慢性进展的作用。

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前言

第一部分抗增殖蛋白在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中的表达和意义

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附图

第二部分全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织抗增殖蛋白表达的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附图

全文总结

抗增殖蛋白的研究进展

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