抗IL-9抗体对小鼠哮喘模型的作用

摘要

目的:尽管大量证据显示IL-9和哮喘有关,但未见应用IL-9拮抗剂治疗哮喘的相关报道.该研究将外源性抗IL-9中和抗体应用于小鼠哮喘模型,通过比较不同干预措施(正常对照组、阳性对照组、地塞米松组、抗IL-9抗体组)对小鼠哮喘模型的影响情况,研究抗IL-9抗体对机体局部炎症反应的影响以及主要免疫系统中T细胞功能的影响,旨在进一步证实IL-9在过敏性哮喘中的作用,了解阻断IL-9在哮喘中的潜在治疗价值.方法:第一部分:6-8周的雌性BALB/c小鼠共20只,随机分为2组:阴性对照组、阳性对照组,每组10只小鼠.阳性对照组小鼠在第0、7、14天腹腔注射OVA混悬液致敏.阴性对照组生理盐水替代OVA混悬液进行腹腔内注射.第15~20天所有小鼠一起吸入OVA雾化溶液进行激发,每天一次每次20分钟.末次激发24小时后麻醉处死小鼠,眼球取血,全血离心后析出血清,测血清中的细胞因子.作支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞计数和细胞因子检测,并进行肺组织学检查.第二部分:6-8周的雌性BALB/c小鼠共40只,随机分为4组:阴性对照组、阳性对照组、地塞米松组、抗IL-9抗体组.分组后建立小鼠哮喘模型.除阴性对照组外,其它三组小鼠在第0、7、14天腹腔注射OVA混悬液致敏.阴性对照组采用生理盐水替代OVA混悬液进行腹腔内注射.第15~20天所有小鼠一起吸入OVA雾化溶液进行激发,每天一次每次20分钟,其中地塞米松组和抗IL-9抗体组雾化前进行药物干预.末次激发24小时后麻醉处死小鼠,取外周血测定血清中的细胞因子;作支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞计数和细胞因子检测;并进行肺组织学检查.第三部分:选取阳性无干预组、地塞米松组、抗IL-9抗体组三组小鼠.无菌操作取出脾脏,将其在金属网上磨碎以制备单细胞悬液,细胞调至2×10<'6>个/ml,加入OVA作为抗原刺激.无菌分离出股骨,剪开股骨头,暴露骨髓腔,用RPMI1640冲洗骨髓腔,制备骨髓细胞悬液,细胞调至2×10<'6>个/ml.脾细胞悬液和骨髓细胞悬液置于5％C02的潮湿环境中,37℃培养24小时后收集细胞培养上清液,检测细胞因子.

目录

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英文详细摘要

引言

材料

第一部分BALB/c小鼠哮喘模型中的IL-9

方法

结果

讨论

第二部分抗IL-9抗体对BALB/c哮喘小鼠肺部炎症的影响

方法

结果

讨论

第三部分抗IL-9抗体对BALB/c哮喘小鼠T细胞功能的影响

方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

综述