薏苡脂的降脂效果以及对肝转录组和肠道微生物的影响

摘要

薏苡仁常作为药食同源的中药材，营养全面丰富且具有很多的药理活性，在现代临床上也有很多应用。薏苡仁中除了氨基酸、蛋白质这些常见的营养物质外，还含一些生物活性成分，它们主要是薏苡仁多糖和薏苡脂类物质等。薏苡脂有降糖降脂、抗氧化、增强免疫以及抗肿瘤等作用。一直以来，关于其生物活性的机制研究，主要集中于它的抑癌、抗癌等，在降脂减重及其代谢的分子机制方面的研究较缺乏。本项研究在薏苡脂提纯的基础上，通过实验鼠的生理指标、肝脏转录组和肠道微生物菌群变化等分析，试图探究薏苡脂的主要作用机制，其结果如下。 通过正交试验确定超声波辅助提取薏苡脂的最佳工艺条件为，溶剂采用正己烷，料液比1∶10，提取时间50min。通过5周高脂饲料诱导，建立了小鼠高脂模型。经过5周的薏苡脂给药治疗之后，结果表明，薏苡脂给药可以明显的降低模型小鼠的体重、肝重以及脂肪重;肝脏的病理切片结果显示，薏苡脂可以适当改善肝脏的脂肪水样病变以及减少模型肝脏的脂滴数量;生理指标检测显示，薏苡脂给药可以明显降低血清中TC、LDL-C的浓度以及显著升高HDL-C的浓度，明显降低AST、ALT、MDA的浓度，一定程度升高了SOD以及HOSC等指标的浓度;GC-MS检测血清代谢物发现，薏苡脂可以显著降低游离脂肪酸的浓度以及改变脂代谢糖代谢通路中的某些代谢物的含量。上述这些结果表明薏苡脂有降脂减重的活性，同时可以缓解机体的肝损伤以及提高机体的抗氧化活性。 通过转录组测序手段的分析，研究了薏苡脂对小鼠肝脏脂代谢相关基因转录水平的影响，转录组数据结果分析显示薏苡脂能够调控高脂饮食诱导的模型小鼠的脂代谢相关的一些通路过程，且主要集中在脂代谢过程中的关键通路上相关的调控因子的转录表达上。16S rDNA测序分析发现高脂饲料诱导之后，模型小鼠的肠道微生物菌群的丰度发生了变化，而薏苡脂的处理并没有显著的改善。 由此表明，薏苡脂可以够增强机体的抗氧化能力，缓解并修复长期高脂饮食造成的肝脏损伤，并且通过对机体脂代谢相关途径通路的调控进而影响机体脂肪生成累积，最终达到降脂、减重、修复肝损伤的目的，避免病情严重。

目录

声明

摘要

论文中缩略语表格

1 前言

1．1薏苡仁

1．1．1薏苡仁活性功效的研究

1．1．2薏苡仁减肥调脂功效

1．2高血脂

1．2．1高血脂症状以及危害

1．2．2高血脂治疗药物

1．2．3高血脂相关的几种关键酶和相关因子

1．2．4高血脂动物模型建立方法

1．3转录组技术研究进展

1．3．1转录组技术的发展

1．3．2转录组技术的应用

1．4肠道微生物与疾病

1．4．1高脂饮食对肠道微生物的影响

1．4．2 16S rDNA测序技术

1．5课题研究的目的与意义

1．6本文研究的内容

2材料与方法

2．1药材

2．2主要试剂

2．3实验仪器

2．4．1薏苡脂的提取以及成分分析

2．4．2动物模型的建立

2．4．3实验分组与动物饲养

2．4．4样本取材方法

2．4．5生化指标的检测

2．4．6组织病理学检测

2．4．7 GC／MS血清样品检测

2．4．8小鼠肝脏RNA-seq测序

2．4．9小鼠肠道内容物16 S rDNA测序

2．5统计分析

3结果与讨论

3．1．1有机溶剂对薏苡脂提取率的影响

3．1．2料液比对薏苡脂提取率的影响

3．1．3提取时间对薏苡脂提取率的影响

3．1．4超声波辅助提取正交试验结果

3．1．5最适提取工艺的验证试验

3．1．6薏苡脂的GC／MS分析

3．1．7小结

3．2薏苡脂对高脂小鼠的影响

3．2．1体重以及脏器重的影响

3．2．2生化指标的影响

3．2．2肝损伤以及氧化应激的影响

3．2．4小鼠肝脏组织切片分析

3．2．5血清代谢物的变化

3．2．6小结

3．3薏苡脂对小鼠肝转录组的影响

3．3．1基因表达结果统计

3．3．2样品基因表达差异分析

3．3．3讨论

3．3．4小结

3．4薏苡脂对小鼠肠道微生物的的影响

3．4．1肠道微生物的种群分布

3．4．2讨论

4结论

4．1全文总结

4．2创新点

4．3论文不足

5展望

参考文献

7攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢

附录