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缩略语
第一章Arp2/3复合物研究进展
1 前言
2 Arp2/3复合物的结构特点
2.1 Arp2/3复合物的组成
2.2 Arp2/3复合物各亚单位的排列
2.3 Arp2/3复合物晶体结构特点
3 Arp2/3复合物的活化机制
4 Arp2/3复合物在细胞肌动蛋白丝装配过程中的作用
5 Arp2/3复合物的调节蛋白
5.1 WASp/Scar蛋白家族的成员和结构特点
6 研究展望
第二章实验设计方案
1 试验目的和意义
2 研究内容
3 实验流程图
第三章全基因 cDNA 的获得与生物信息学分析
1 材料与试剂
1.1材料
1.2生物信息学工具
1.3试剂和仪器
2 方法
2.1基因序列的电子克隆与生物信息学分析
2.2总RNA的提取与cDNA的合成
2.3 RT-PCR获得全长cDNA
3 结果
3.1家蚕蛹总RNA琼脂糖电泳检测
3.2 RT-PCR扩增全长基因片段
3.3全基因的生物信息学分析
4 讨论
第四章家蚕 Bmp21 基因的克隆
1 试剂与材料
1.1材料
1.2试剂的配制
2 方法
2.1凝胶回收、纯化PCR产物
2.2连接反应
2.3 E.coli TG1感受态细胞的制备(CaCl2法)
2.4连接产物的转化
2.5重组克隆的筛选与鉴定
3.1重组质粒pGEM-T-easy-Bmp21的PCR扩增和双酶切鉴定
4 小结
第五章重组表达质粒的构建及在大肠杆菌中诱导表达
1 材料与试剂
1.1材料
1.2试剂
1.3试剂配制
2 方法
2.1 pGEM-T-easy-Bmp21重组质粒与表达载体pET-28a双酶切
2.2酶切产物处理及回收
2.3连接反应
2.4 E.coli BL21(DE3)感受态细胞的制备(CaCl2法)
2.5重组表达质粒的转化及鉴定
2.6融合蛋白在大肠杆菌中的表达
2.7 SDS-PAGE电泳分析
2.8融合蛋白表达量的确定
2.9 Bradford 检测方法
2.10重组蛋白的纯化
3 结果
3.1重组表达质粒的构建策略
3.2重组表达质粒的鉴定结果
3.3 BL21-pET-28a-Bmp21不同时间的诱导表达
3.4表达产物的纯化结果
4 讨论
第六章多克隆抗体制备及效价测定
1 试剂与材料
1.1实验动物
1.2抗体制备用试剂
1.3抗体纯化用试剂
1.4 ELISA用溶液
1.5 Western blotting用溶液
2.1抗体制备
2.2抗体的效价测定(ELISA)
2.3融合蛋白的Western blotting鉴定
3 结果
3.1抗体制备与纯化
3.2抗体的效价测定
3.3 Western blotting检测结果
4 讨论
第七章RNAi
1 材料和试剂
1.1材料和仪器
1.2试剂
2 方法
2.1 dsRNA的合成
2.2 RNAi
2.3 MTT法检测
2.3流式细胞仪检测
3 结果
3.1 dsRNA的合成
3.2 dsRNA的定量
3.3 MTT结果
3.4RNAi结果
3.4流式细胞仪检测结果
4 讨论
第八章Bmp21亚细胞定位
1 试剂与材料
1.1材料
1.2试剂配制
2 方法
3 结果
4 讨论
结论
参考文献：
致谢
浙江理工大学;
