慢性应激对大鼠海马脑区突触相关蛋白表达的影响

摘要

目的:通过构建慢性心理应激模型和慢性疼痛模型大鼠，从大鼠行为改变、分子蛋白表达水平等方面，探讨(1)不同来源的慢性应激对大鼠行为改变及痛敏阈限的影响;(2)慢性应激对大鼠海马脑区突触相关蛋白表达量的影响;(3)慢性应激条件下，大鼠海马脑区突触相关蛋白表达是否存在左右脑差异。
　　方法:雄性Sprague-Dawley大鼠，随机分配到空白组、心理应激组、假手术组和疼痛应激组中。心理应激组给予大鼠5周慢性不可预见温和应激的方法建立慢性心理应激模型，疼痛组大鼠采用保留性神经损伤的方法建立慢性疼痛应激模型，观测模型建立期间大鼠体重变化，并采用糖水偏好实验测试，机械性痛敏阈限测量考察慢性应激模型是否建立成功。行为实验后，进一步研究慢性应激对海马脑区突触的影响，采用蛋白免疫印迹方法，检测海马区域postsynaptic density protein95(神经突触标记物)，2'，3'-Cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase(少突胶质细胞标记物)，synaptophysin(突触素标记物)表达的变化及左右海马相关蛋白表达是否存在差异。
　　结果:(1)慢性应激引发大鼠活跃程度下降，降低大鼠机械性痛敏阈限;(2)慢性心理应激造成海马PSD95蛋白，CNPase蛋白及synaptophysin蛋白相对表达量显著下降，慢性疼痛应激下海马PSD95蛋白，CNPase蛋白及synaptophysin蛋白相对表达量有下降趋势，但是没有统计学差异;(3)慢性应激在对海马脑区突触相关蛋白表达量的影响上，存在不同程度的左右脑差异。
　　结论:(1)慢性应激造成大鼠行为改变，并降低大鼠机械性痛敏阈限;(2)慢性心理应激降低大鼠海马脑区突触相关蛋白相对表达量;(3)慢性应激抑制对大鼠海马脑区突触的影响存在偏侧化效应。

目录

声明

摘要

引言

1．1 神经再生

1．1．1 成年期神经再生

1．1．2 海马神经再生

1．1．3 神经细胞再生

1．1．4 神经突触的可塑性

1．2 应激对海马脑区的影响

1．2．1 慢性应激对神经发生的影响

1．2．2 神经损伤

1．3 慢性应激对大鼠海马脑区突触可塑性的影响

第二章 研究设计

2．1 研究目的

2．2 研究意义

2．3 研究内容

2．4 研究假设

2．5 研究创新

2．6 研究方法

第三章 实验研究一 慢性应激对大鼠行为及痛敏阈限的影响

3．1 材料和方法

3．1．1 动物与分组

3．1．2 设备及仪器

3．1．3 药品及试剂

3．1．4 慢性应激模型

3．1．5 体重称量

3．1．6 糖水偏好实验

3．1．7 机械性痛敏阈限测量

3．1．8 统计方法

3．1．9 实验地点

3．2 结果

3．2．1 慢性应激对体重变化的影响

3．2．2 慢性应激对糖水偏好的影响

3．2．3 慢性应激对机械性痛敏阈限的影响

3．3 讨论

3．3．1 慢性应激模型的建立

3．3．2 慢性应激对大鼠行为改变及疼痛阈限的影响

3．4 小结

第四章 实验研究二 慢性应激对海马神经突触再生的影响

4．1 材料与方法

4．1．1 动物与分组

4．1．2 仪器及设备

4．1．3 药品及试剂

4．1．4 组织处理

4．1．5 Western Blotting

4．1．6 统计方法

4．1．7 实验地点

4．2 结果

4．2．1 慢性应激对海马PSD95蛋白相对表达量的影响

4．2．2 慢性应激对海马synaptophysin蛋白相对表达量的影响

4．2．3 慢性应激对海马CNPase蛋白相对表达量的影响

4．3 讨论

4．3．1 慢性应激对海马PSD95蛋白相对表达量的影响

4．3．2 慢性应激对海马synaptophysin蛋白相对表达量的影响

4．3．3 慢性应激对海马CNPase蛋白相对表达量的影响

4．3．4 慢性应激对海马脑区突触相关蛋白相对表达量于左右脑的影响

4．3．5 慢性应激影响大鼠海马脑区突触相关蛋白的表达

4．4 小结

第五章 总讨论

6．1 研究结论

6．2 研究展望

参考文献

附录

致谢