不同产地和生长年限黄芩质量评价及药理作用研究

摘要

药材黄芩为唇形科植物黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）的干燥根，是一种常用的中药材，被广泛应用于临床疾病的治疗。由于黄芩的药效显著，使用范围广，野生黄芩被过度采挖，导致黄芩药材资源匮乏，许多地区开始引种进行人工栽培黄芩，但由于栽培模式和生境的不同，全国各个产地黄芩的质量和临床效果有很大差别。因此，分析不同产地黄芩的质量差异，探究引起黄芩品质和药效的影响因素非常重要。本文通过对全国6个主产区和不同生长年限的黄芩药材中有效成分、抗氧化活性和抑菌作用的分析，探究生态因子对黄芩有效成分的影响，从抗氧化活性和抑菌作用两个方面分析黄芩的药理作用，为黄芩药材的规范化生产和广泛的临床使用提供理论基础。主要研究结果如下:
　　1.依据《中华人民共和国药典》（2015年版，一部），测定22个批次黄芩药材的水分、总灰分和醇性浸出物含量，分析不同产地和生长年限黄芩的质量。结果显示，所有产地黄芩药材的水分含量都符合2015年版《中华人民共和国药典》标准;除陕西商洛二年生、陕西商洛四年生和山东潍坊二年生黄芩药材的总灰分含量超过2015年版《中华人民共和国药典》标准外，其他批次药材总灰分含量均符合2015年版《中华人民共和国药典》标准;除甘肃定西一年生、甘肃定西二年生和河北承德一年生黄芩药材的醇性浸出物含量低于2015年版《中华人民共和国药典》标准外，其他批次药材总灰分含量均符合2015年版《中华人民共和国药典》标准。不同产地和生长年限的黄芩质量之间存在较大差异，应该加大对药材质量的把关，合理规范化种植药材。
　　2.采用超声提取、高效液相色谱（HPLC）检测黄芩药材中4种有效成分，并建立指纹图谱。结果表明，6个产地22批黄芩样品中有效成分含量和总黄酮含量有显著差别，山东潍坊一年生黄芩黄芩苷的含量最高，山西长治二年生黄芩黄芩素、汉黄芩素的和千层纸素A的含量最高，河北承德野生黄芩植株总黄酮的含量最高。总体来看，山东、陕西和河北产地黄芩的品质较好，且一年生黄芩中有效成分的含量要高于多年生黄芩。同时建立中药指纹图谱，检测出13个共有峰，所有样品的相似度良好，表明HPLC与中药指纹图谱结合可以全面评价黄芩质量。
　　经相关分析发现，四种有效成分之间存在相关性，即黄芩苷与汉黄芩素显著负相关，黄芩素与汉黄芩素、千层纸素A均极显著正相关，汉黄芩素与千层纸素A极显著正相关，总黄酮与黄芩苷极显著正相关，四种成分之间是相互转化、相互影响的。
　　3.通过对有效成分与生态因子之间的相关性分析和逐步回归分析，发现黄芩的有效成分与生态因子之间有相关性，其中千层纸素A与经度、年最高温、七月平均气温和年均水蒸气压显著负相关，总黄酮与年均水蒸气压显著正相关，说明生态因子对黄芩黄酮类物质的积累有影响，应合理选择种植采收产地和季节，提高黄芩品质。
　　4.利用DPPH法和ABTS法分析黄芩成分抗氧化活性，不同产地和生长年限黄芩的抗氧化活性之间存在差异。山东和山西长治黄芩药材抗氧化活性较强，陕西商洛黄芩药材抗氧化活性较弱，且一年生黄芩比多年生黄芩抗氧化活性强。同时，相关性分析结果表明，黄芩药材抗氧化活性与黄酮类物质紧密相关，其中黄芩苷含量与DPPH和ABTS的IC50值呈显著负相关关系，说明黄芩药材抗氧化活性与黄芩苷含量有极显著的正相关性，也就是说黄芩药材抗氧化活性随着黄芩苷含量的升高而增强。
　　5.采用滤纸片和二倍稀释法分析黄芩对细菌和真菌的抑制效果，包括白色念珠菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。不同产地和生长年限黄芩对四种菌有不同程度的抑制效果，且抑菌效果随着提取物浓度的升高而增强。黄芩提取物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌抑制效果最好，较高浓度的黄芩提取物对铜绿假单胞菌和大肠杆菌也有抑制作用，其中甘肃定西产地的黄芩提取物对四种菌的抑制效果最强。说明黄芩具有广谱的抑菌性，对于细菌和真菌都较强的抑制作用，可以广泛应用于临床试验。

目录

声明

论文说明

摘要

第一章 文献综述

1．1 黄芩的概述

1．1．1 黄芩的主要品种及分布

1．1．2 黄芩的成分

1．1．3 黄芩的现代药理作用

1．2 生态因子对药用植物的影响

1．2．1 气候因子

1．2．2 土壤因子

1．2．3 地理因子

1．3 中药指纹图谱的概述

1．3．1 生物指纹图谱技术

1．3．2 化学指纹图谱技术

1．4 研究目的及意义

第二章 不同产地和生长年限黄芩药材质量的研究

2．1 引言

2．2 仪器、试剂与材料

2．2．1 仪器

2．2．2 试剂

2．2．3 材料

2．3 实验方法

2．3．1 实验方法和测定指标

2．3．2 药材处理

2．3．3 水分测定

2．3．4 总灰分测定

2．3．5 醇性浸出物测定

2．4 实验结果

2．4．1 不同产地和生长年限黄芩的水分含量

2．4．2 不同产地和生长年限黄芩的总灰分含量

2．4．3 不同产地和生长年限黄芩的醇性浸出物含量

2．5 小结与讨论

第三章 不同产地和生长年限黄芩药材HPLC指纹图谱的建立及其有效成分与生态因子关系的研究

3．1 引言

3．2 仪器、试剂与材料

3．2．1 仪器

3．2．2 试剂

3．2．3 材料

3．3 实验方法

3．3．1 黄芩有效成分的测定

3．3．2 黄芩HPLC指纹图谱的建立

3．3．3 生态因子对黄芩药材有效成分的影响

3．4 实验结果分析

3．4．1 黄芩有效成分的测定

3．4．2 黄芩样品HPLC指纹图谱的建立和分析

3．4．3 生态因子对黄芩药材有效成分的影响

3．5 小结与讨论

3．5．1 不同产地和生长年限黄芩有效成分差异

3．5．2 黄芩有效成分指纹图谱建立

3．5．3 生态因子对黄芩药材有效成分的影响

第四章 不同产地和生长年限黄芩总黄酮抗氧化活性与有效成分关系的研究

4．1 引言

4．2 仪器、试剂与材料

4．2．1 仪器

4．2．2 试剂

4．2．3 材料

4．3 实验方法

4．3．1 黄芩四种有效成分的提取、测定

4．3．2 黄芩抗氧化活性的测定

4．3．3 数据分析

4．4 实验结果

4．4．1 黄芩四种有效成分的提取、测定

4．4．2 不同产地和生长年限黄芩的抗氧化活性

4．2．4 相关性分析

4．5 小结与分析

第五章 不同产地和生长年限黄芩的抑菌作用

5．1 引言

5．2 仪器、试剂与材料

5．2．1 仪器

5．2．2 试剂

5．2．3 材料

5．3 实验方法

5．3．1 黄芩供试样品的制备

5．3．2 培养基的制备

5．3．3 供试菌液的配置

5．3．4 纸片法测定黄芩抑菌效果

5．3．5 二倍稀释法测定黄芩抑菌效果

5．4 实验结果

5．4．1 纸片法测定黄芩抑菌效果

5．4．2 二倍稀释法测定黄芩抑菌效果

5．5 小结与讨论

第六章 总讨论

第七章 总结

参考文献

攻读学位期间的研究成果

致谢