CDK4/6抑制剂SHR6390抗RB阳性肿瘤活性的研究

摘要

细胞的生长和增殖取决于细胞周期的运转。失调的细胞周期会导致不受控的细胞增殖，从而促进肿瘤的发生和发展。细胞周期运转依赖两类蛋白:cyclin和CDKs，其中cyclin D-CDK4/6-RB通路通过调节G1/S期检查点来控制细胞周期进程，该通路失调会导致增值异常，促进多种类型癌症的生长。因此，抑制cyclinD-CDK4/6-RB途径是一种有效的治疗癌症的方法。 本研究中，我们利用一种新型CDK4/6抑制剂SHR6390进行了临床前抗肿瘤活性的研究。在体外实验中，通过SRB或MTT方法检测了SHR6390对肿瘤细胞生长的影响;Western Blotting检测了SHR6390对RB和cyclin D1等蛋白表达量及RB磷酸化水平的影响;在体内实验中，通过小鼠移植瘤模型观察了SHR6390处理后肿瘤组织的生长情况。结果发现，SHR6390对RB表达阳性的肿瘤细胞表现出广谱且较强的抗增殖活性，并诱导细胞周期发生G1期阻滞，诱导细胞衰老，同时降低了RB蛋白Ser780-磷酸化的水平。动物实验表明，与已上市的CDK4/6抑制剂Palbociclib相比，口服SHR6390在一些异种移植瘤中发挥相似或更好的抗肿瘤疗效。SHR6390在人结肠癌COLO205模型中产生明显的肿瘤消退，这一现象与肿瘤组织中的靶点RB蛋白磷酸化被持续抑制一致。此外，在ER阳性乳腺癌和HER2阳性乳腺癌中，SHR6390分别克服了对内分泌治疗的耐药和对HER2靶向抗体的耐药。最后，在乳腺癌MCF7和模拟绝经后乳腺癌的MCF7/ARO小鼠移植瘤模型中，我们发现SHR6390联合内分泌治疗在ER阳性乳腺癌中发挥了显著的协同抗肿瘤作用。 综上，我们研究结果表明，SHR6390能有效抑制RB阳性肿瘤细胞的体内外生长，并且具有协同内分泌疗法治疗ER阳性乳腺癌的效应，是一种新型的CDK4/6抑制剂，具有良好的抗癌药物特性，可用于抗肿瘤治疗，为正在进行的临床实验提供依据和参考。

目录

声明

摘要

1．1前言

1．2细胞周期

1．3 CDK4／6

1．4 RB蛋白

1．5 CDK4／6抑制剂

1．6内分泌疗法

1．7 CDK4／6抑制剂与内分泌疗法联用

1．8研究目的及意义

第二章CDK4／6抑制剂SHR6390抗RB阳性肿瘤的研究

2．1实验材料

2．1．1实验仪器耗材试剂

2．1．2细胞株

2．1．3实验主要溶液的配备

2．2实验方法

2．2．1细胞培养

2．2．2细胞增值抑制实验

2．2．3 Western blot法

2．2．4流式细胞术测细胞周期

2．2．5酶学实验

2．2．6细胞衰老实验

2．2．7裸小鼠移植瘤的抑制实验

2．3统计学分析

2．4实验结果与分析

2．4．1 CDK4／6抑制剂SHR6390抑制RB阳性肿瘤细胞的增值

2．4．2 SHR6390通过抑制CDK4／6-RB途径诱导细胞周期阻滞

2．4．3 SHR6390在COLO 205异种移植瘤模型中的PD／PK研究

2．4．4单用SHR6390在人类异种移植瘤模型中的体内抗肿瘤活性

2．4．5 SHR6390与内分泌疗法结合在ER阳性乳腺癌细胞中发挥协同抗增殖作用

2．4．6 SHR6390与内分泌疗法结合在ER阳性乳腺癌移植瘤中发挥协同抗肿瘤作用

第三章讨论与展望

参考文献

硕士期间研究成果

致谢