水产品中尼泊金酯、磺胺和孔雀石绿残留检测的方法学研究

摘要

兽药残留造成食品安全问题已广泛存在,严重危害人类的健康。当前水产食品中尼泊金酯、磺胺和孔雀石绿残留检测方法前处理复杂,精确度不高。因此,急需能够快速高效检出残留的分析方法用于食品安全分析。
　　 通过使用经典van Deemter和Knox曲线方程,以及新型Poppe曲线方程,对熔融核填料Halo-C18色谱柱与常规全多孔超高压BEH-C18色谱柱柱效进行比较。在BEH-C18柱的传质阻力主导部位,塔板高度随着流速v的增大而增大,但是Halo-C18色谱柱的塔板高度随着流速v的增大趋于平衡。这说明Halo-C18色谱柱的传质阻力项,远比BEH-C18色谱柱小。Halo C18色谱柱的熔融核结构明显改善了流动相在色谱柱内的流动动力,减少了传质阻力,赋予了色谱峰更好的分离度与分离效率。因此,实验选用Halo-C18色谱柱,建立海鲜调味品中尼泊金酯类防腐剂快速定量测定方法。尼泊金酯(对羟基苯甲酸酯)是一类低毒高效的消毒灭菌防腐剂,已被广泛用于食品、饮料、化妆品、医药等许多行业,我国GB2760-2011规定:对羟基苯甲酸乙酯用于酱油、酱料,最大使用量为0.25g/kg经验证,该方法检出限为20 ng/mL,线性良好(R2为0.9996～0.9999)。日内/日间精密度小于7.08％。在100,200 and500 ng/mL三个浓度水平下,回收率为84％～102％。该方法灵敏度高,定量准确,适用于海鲜调味品的质量安全控制。
　　 使用熔融核填料色谱柱,整合固相基质分散(MSPD)前处理方法,建立了在线UPLC-MS/MS联用方法。磺胺类药物(Sulfonamides,Sas)是一类传统的人工合成抗菌药物,我国《动物性食品中兽药的最高残留量》中明确规定,磺胺在食用动物的肾、肝、肌肉、脂肪中的最大残留量不得超过100μ g/kg,奶制品中为100μ g/kg。该方法无需单独前处理,只需将目标样品与MSPD填料研磨混匀,即可上样。将该新型方法用于水产品中的13种磺胺同时定量检测分析。质谱采用ESI正源多反应监测(MRM)模式。根据欧盟2002/657/EC决议,对该方法进行验证。结果表明,该方法在浓度为0.1-100 ng/mL范围内线性关系良好(R2=0.993-0.998)。日内/日间精密度相对标准偏差波动范围分别为1.8％-7.8％和2.8％-10.3％。所有目标化合物回收率在69.0-96.3％之间,RSDs≤13.2％。新型在线MSPD-LIPLC-MS/MS方法适用于水产品中磺胺类药物的定量检测,该方法快速、灵敏,结果可靠。
　　 整合在线联用固相萃取(SPE)技术与超高效液相/串联质谱技术,建立了在线SPE-LC-MS/MS定量分析水产品中三芳基甲烷类化学物质的方法。2002年5月,我国将孔雀石绿列入了《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》,明令禁止其用于所有可食用动物。实验优化了在线SPE-LC-MS/MS设备的各个参数,使得目标化合物回收率达到最高。同时,引入了一种新型的潜力填料一多壁碳纳米(MWCNTs)。MWCNTs吸附性良好,回收率高,其性能媲美于C18填料,且其成本较低,价格低廉,是一种十分优秀的常规填料替代品。在线SPE-LC-MS/MS方法极大地缩短了分析时间,且峰形良好,能够使定量准确。串联质谱的多离子反应监测(MRM)模式,保证每种化合物色谱峰能够获得足够的数据采集点数,提高了灵敏度,降低了检测限。采用空白基质溶稀释标准曲线各点,有效地降低了基质干扰,采用内标法进行定量,三苯甲烷类化合物标准曲线的相关系数良好。内标法的使用,有效的减小了多种试验误差,方法的精密度和准确度较外标法更好。经方法学验证:孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫以及碱性艳绿的决定限度CCα为0.13～0.42μg/kg,检测容量(CCβ)为0.17～0.54μg/kg。线性范围均为0.5μg/L～100μg/L,R2分别为0.9990～0.9995,具有良好的线性关系。三苯甲烷类化合物回收率都比较好,回收率在84.6～101.4％之间,相对标准偏差在2.8％～10.2％之间。本方法可适用于水产品中三苯甲烷类化合物的定性、定量检测分析,具有定量准确、灵敏度高、分析快速、操作简单等优点。