细胞色素P450 2D6和2C18的可变剪接研究

摘要

为了研究CYP2D6和CYP2Cl8的代谢功能,用RI-PCR技术从中国汉族人的肝癌旁组织中克隆人CYP2D6和CYP2CI8cDNA,在测序鉴定时,发现了一种新的CYP2D6前mRNA的可变剪接,进一步在其它肝癌旁组织中用RT-PCR技术鉴定了另两种可变剪接.也在肝癌旁组织中发现了一个缺失外显子5的CYP2C18的剪接变异体,并对其代谢的影响进行了研究.第一部分三种新的CYP2D6前mRNA可变剪接鉴定;结论:鉴定了三种CYP2D6前mRNA的可变剪接.CYP2D6前mRNA的可变剪接在肝癌旁组织中出现很常见.它们不是由于基因组DNA的突变或缺失引起,可能是剪接有关的调控蛋白的改变引起的.预期这三种可变剪接都会使CYP2D6的活性下降,它们可能是对CYP2D6转录后的下调.第二部分人细胞色素P-450 2C18外显子5缺失的可变剪接的鉴定及其对代谢活性的影响：结论:首次在人肝癌旁组织中鉴定了遗漏外显子5的CYP2CI8 cDNA.外显子遗漏的CYP2CI8在肝癌旁组织中并不少见.属于Thr385等位基因型的CYP2CI8X1具有较高的甲苯磺丁腺羟化酶比活性,可以明显增强环磷酞胺和异环磷酰胺的细胞毒效应.第5外显子缺失的CYP2Cl8X2没有甲苯磺丁脲羟化酶活性,对低浓度的环磷酰胺和异环磷酰胺没有明显的代谢作用,而对高浓度环磷酰胺和异环磷酰胺有一定的代谢活化能力.

目录

缩略语

前言

实验材料

基本实验方法

第一部分三种新的CYP2D6前mRNA可变剪接鉴定

方法

结果

讨论

结论

第二部分人细胞色素P-4502C18外显子5缺失的可变剪接的鉴定及其对代谢活性的影响

方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述人细胞色素P450 mRNA的可变剪接

附录1 CYP2D6等位基因命名

附录2 CYP2C18 eDNA序列

附录3发表论文

致谢