IL-2基因修饰的肿瘤细胞来源的Exosomes的抗肿瘤作用及相关机制研究

摘要

为了进一步增强TEXs的抗肿瘤活性,我们通过将含有小鼠IL-2基因的腺病毒载体转染EG.7-OVA肿瘤细胞(稳定表达OVA作为模拟抗原),并分离纯化它们分泌的Exosomes,将其命名为Exo/IL-2,同时将对照腺病毒载体AdLacZ转染的EG.7-OVA肿瘤细胞所分离纯化的Exosomes命名为Exo/LacZ.通过ELISA和Western Blot,我们在制备的Exo/IL-2中检测到了IL-2,而在Exo/LacZ未检测到IL-2.用这些Exosomes免疫小鼠能诱导OVA抗原特异性的免疫应答,其诱导的免疫应答主要是Th1型和CTL细胞免疫,这些免疫反应能抑制肿瘤的生长,并能保护小鼠抵抗野生型EG.7-OVA肿瘤细胞的攻击.用Exo/IL-2免疫小鼠能导致70％的受EG.7-OVA攻击小鼠长期存活且小鼠的肿瘤体积明显缩小.我们证实用Exo/IL-2免疫小鼠能更显著地激起小鼠的T淋巴细胞显著的增殖反应,分泌较高水平的IL-2和IFN-γ,并且还发现免疫小鼠的NK、CTL的活性也显著增强.用OVA、OVA<,257-264>或对照多肽VSV<,324-332>刺激小鼠脾细胞的ELISPOT实验结果也表明:Exo/IL-2免疫小鼠能更显著增强小鼠脾细胞的Th1反应.免疫细胞亚群删除实验也证实:在抗肿瘤免疫反应中,CD4<'+>、CD8<'+>T和NK细胞都起了重要的作用,其中CD8<'+>T细胞起主要关键作用.通过以上实验,表明Exo/IL-2是一种有应用前景的肿瘤疫苗.

目录

英文缩写

前言

实验材料

实验方法

统计分析

实验结果

讨论

主要结论

参考文献

综述:Exosomes与免疫治疗

致谢