柿叶中有效成分的提取与分离研究

摘要

柿叶中含有较多的药理活性成分，为充分利用柿叶天然资源，本文对柿叶进行了深加工研究。总体处理过程是：以柿叶为原料提取得到总三萜，进而从中分离出熊果酸；提取出总三萜后的柿叶残渣，继续作为原料用于提取总黄酮；分离出大部分熊果酸后的总三萜，用高速逆流色谱(HSCCC)进一步分离得到另外三种三萜酸。主要内容包括： (1)对柿叶总三萜提取工艺进行了优化，考察了温度、液固比、提取时间和提取次数对石油醚脱脂的影响以及不同地方、不同提取溶剂、提取温度、液吲比、提取时间和提取次数对总三萜提取的影响，得出柿叶总三萜提取较好的工艺条件。 (2)以柿叶总三萜为原料，对熊果酸的分离与精制进行了优化，考察了温度、液固比、脱色时间和脱色次数对石油醚及活性炭脱色的影响，脱色后的总三萜经无水乙醇重结晶后可得到无色针状熊果酸晶体。 (3)为较准确测定不同柿叶粗提物中的总黄酮，考察了六种分光光度法和两种HPLC测定法。重点对AlCl3-(HAc-NaAc)显色法进行了优化，考察了显色剂用量和显色时间对显色后吸光度的影响。发现，在加入酸性缓冲溶液HAc-NaAc[1MHAc∶1MNaAc=9.25∶0.75(V/V,pH=3.6)]的条件下，用AlCl3显色，在400nm附近测定总黄酮的方法比较好。 (4)以提取完三萜酸后的柿叶为原料，总黄酮得率及粗提物中总黄酮纯度为指标，考察了提取剂乙醇水溶液的浓度、提取温度、液固比、提取时间和提取次数对总黄酮提取的影响，得到用乙醇水溶液提取柿叶总黄酮的适宜工艺条件。 进一步用乙酸乙酯萃取法和梯度pH萃取结合乙酸乙酯萃取法对柿叶总黄酮进行了精制研究。 (5)以分离出大部分熊果酸后的总三萜为原料，通过优化实验条件，建立了一种用制备型的高速逆流色谱仪(HSCCC，柱体积为1000mL)快速高效地分离柿叶中五环三萜酸的方法。实验对两相溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水各组分的比例进行了优化，并考察了流动相流速、温度和螺旋管柱的转速对固定相保留率的影响，还考察了单向洗脱模式和双相洗脱模式对分离的影响。 (6)建立了一种简单、准确、灵敏度高和重现性好的HPLC-UV的分析方法，用于同时测定柿叶叶三种结构非常相似的活性物质(barbinervicacid，rotungenicacid和24-hydroxyursolicacid)，并且考察了不同提取溶剂和不同生长地方对柿叶或提取物叶，这三种物质含量的影响。

目录

文摘

英文文摘

第一章文献综述

1.1柿叶的研究进展

1.2植物有效成分的提取与分离技术进展

小结

本章参考文献

第二章柿叶中总三萜的提取及熊果酸的分离与精制

第三章柿叶总黄酮的提取与精制

前言

3.1材料、试剂与仪器

3.2实验

3.3结果与讨论

小结

本章参考文献

第四章柿叶中三萜酸的分离

第五章结论与展望

创新性声明

论文成果

致谢

附录