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亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶研究

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缩略语

引言

1材料

2方法

3结果

4、讨论

5、参考文献

综述金属β-内酰胺酶与整合子的研究进展

致谢

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摘要

本文为了解亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性及其金属酶的基因分型,本实验收集国内五个地区临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌140株。通过Etest法和琼脂稀释法测定菌株的最低抑菌浓度(MIC)值,采用纸片协同方法筛选金属酶,并通过PCR法、Southern杂交等方法对金属酶进行基因定位及整合子检测,同时采用PFGE对产金属酶菌株进行同源性分析。 结果显示金属酶筛选共检出产金属酶菌株12株。PCR扩增14株菌株VIM-2基因阳性,其中12株扩增出两种不同长度的整合子,分别携带aacA4、VIM-2及aacA4、VIM-2、aadB基因盒。通过接合试验及质粒抽提物电转化传递金属酶基因均未获成功。14株携带VIM-2基因的铜绿假单胞菌PFGE谱分析共有七种类型。DNASouthern杂交显示VIM-2探针与11株铜绿假单胞菌在50kb染色体DNAXbaI酶切片断产生阳性杂交条带。 以上研究表明,分离自国内五个地区亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶阳性率为10.0%,所产的金属β-内酰胺酶均为VIM-2型金属酶。blaVIM-2的耐药基因盒分布于不同的1类整合子中。脉冲场凝胶电泳显示不同地区的菌株的PFGE图谱不同。

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