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血管内皮生长因子对外周血内皮祖细胞功能的影响

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内皮祖细胞与经皮冠状动脉成形术后再狭窄的防治

人外周血内皮祖细胞的分离、培养和扩增

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摘要

研究目的:观察不同浓度血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养人外周血内皮祖细胞(EPC)生物学功能的影响,探讨VEGF促进EPCs分裂生长的合适浓度。 研究方法:密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞(MNCs),接种至人纤维连接蛋白(humanfibronectin)包被的培养板上,培养4天后收集贴壁细胞,换用配有不同浓度(对照组、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml)VEGF的培养基继续培养3天后进行细胞免疫组化鉴定EPC,采用MTT比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验,观察EPCs的增殖、迁移和黏附能力。 结果:从人外周血能成功分离EPCs细胞,并能分化为血管内皮细胞;从冠心病患者分离的EPCs增殖能力较非冠心病患者弱;VEGF在较低浓度(10ng/ml和20ng/ml)时即能显著促进EPCs生长的各项生物学指标,但高浓度(50ng/ml)时并不能进一步增强这一效应;低浓度(10ng/ml)下VEGF对冠心病患者作用较非冠心病患者弱,高浓度时对两者促进作用相近。 结论:冠心病患者EPCs功能显著减弱,较低浓度的VEGF即可显著增强EPCs的各项生物学功能,可能对损伤血管的再内皮化有益。

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