外源酶对巴西龟生长性能及内源消化酶活性的影响

摘要

本课题以巴西龟(Trachemys scripta elegans)为试验动物，研究了不同生长阶段的巴西龟体养分的组成，并探讨了巴西龟内源消化酶特性及分布规律；采用通用旋转回归设计分析不同酶制剂组合对三种蛋白饲料(白鱼粉、红鱼粉、豆粕)的体外消化率，建立回归模型，从而确定酶制剂的最优配方。在此基础上，研究复合酶制剂对巴西龟生长性能、血清生化指标及内源性消化酶的影响，为合理地使用酶制剂提供依据。主要研究结果如下：
　　 1、巴西龟养分组成含量呈规律性变化。从稚龟到成龟机体粗蛋白含量下降了9.05％(P＜0.05)，粗脂肪含量增重了130.39％(P＜0.05)，钙/磷保持在1.67～1.73：1。从稚龟到成龟龟板粗蛋白含量下降了34.93％(P＜0.05)，粗脂肪含量增长了51.21％(P＜0.05)，龟板中钙/磷水平高于机体，达到2.29～3.08：1。机体氨基酸总量基本保持不变，鲜味氨基酸含量为21％左右，无明显变化。龟板氨基酸总量下降了73.21％，鲜味氨基酸下降36.23％。
　　 2、巴西龟内源消化酶特性和活性分布具有一定差异。胃、胰、前肠、中肠、后肠各部位蛋白酶的最适温度和pH依次为40℃，2.5；50℃，8.0；50℃，7.0；50℃，8.0；50℃，8.5；活力从高到低依次为胰＞胃＞前肠＞后肠＞中肠。各部位淀粉酶的最适温度和pH依次为40℃，8.0；30℃，7.5；40℃，7.0；50℃，8.0；50℃，8.0；活力从高到低依次为前肠＞胰＞后肠＞中肠＞胃。巴西龟胃组织、前肠、中肠、后肠内的pH分别为2.5～3.0、6.5～7.0。
　　 3、在揭示巴西龟内源消化酶特性的基础上，采用通用旋转回归设计，研究不同酶制剂组合对三种蛋白原料(白鱼粉、红鱼粉、豆粕)进行体外消化的影响，找出酶制剂最佳配制方案。模型分析结果表明：豆粕原料消化率大于87％的最佳方案为酸性蛋白酶29.13～32.11g/L，中性蛋白酶35.59～38.16g/L，淀粉酶21.84～22.14 g/L；红鱼粉消化率大于80％的最优方案为酸性蛋白酶28.88～31.69g/L，中性蛋白酶33.72～36.42g/L，淀粉酶22.05～22.10g/L；白鱼粉消化率大于71％的最佳方案为酸性蛋白酶33.05～40.75 g/L，中性蛋白酶33.36～39.12 g/L，淀粉酶18.12～20.58g/L。
　　 4、选取稚龟、幼龟、成龟三个阶段的巴西龟，每个阶段取180只，分别设对照组和试验组。每个组3个重复，每个重复30只。试验组均添加0.5％的复合酶，进行为期45天的饲养试验。试验结束后，每个组取9只屠宰取样测定。研究表明：
　　 (1)外源酶均能不同程度地提高各阶段巴西龟的日增重，其中稚龟试验组增长了13.04％(P＞0.05)，幼龟试验组增长了48.86％(P＜0.05)，成龟试验组增长了41.66％(P＜0.05)。增重率和饲料系数的变化呈现与日增重变化相一致的趋势，稚龟、幼龟、成龟试验组增重率比对照组分别提高7.86％(P＞0.05)、44.17％(P＜0.05)、51.32％(P＜0.05)，饲料系数分别下降了15.79％(P＜0.05)、31.39％(P＜0.05)、26.39％(P＜0.05)。此外，试验组巴西龟采食速度和食欲明显提高。
　　 (2)外源酶不同程度的改善了各阶段巴西龟的内脏器官的相对重量。三个阶段巴西龟试验组胃重比、肝重比、肠重比、去内脏比较对照组有所提高，其中稚龟试验组肝重比、肠重比与对照组相比分别提高54.33％(P＜0.05)、34.48％(P＜0.05)，成龟试验组胃重比提高16.34％(P＜0.05)，幼龟试验组各指标与对照组相比有所提高，但无显著差异(P＞0.05)。
　　 (3)外源酶对巴西龟血清生化指标有显著影响。稚龟试验组与对照组相比，血清尿氮下降了26.48％(P＜0.05)，总蛋白、白蛋白和葡萄糖分别提高了17.22％(P＜0.05)、21.75(P＜0.05)和38.00％(P＜0.05)；幼龟试验组尿氮比对照组下降了46.65(P＜0.05)，钙、磷水平明显升高(P＜0.05)；成龟试验组尿氮下降了38.45％(P＜0.05)，总蛋白和白蛋白分别增加32.90％(P＜0.05)和15.59％(P＜0.05)。
　　 (4)外源酶能不同程度提高三个阶段巴西龟内源消化酶活性。稚龟试验组胃蛋白酶、淀粉酶活性提高了26.24％(P＜0.05)、38.72％(P＜0.05)，前肠脂肪酶活性提高24.29％(P＜0.05)，后肠蛋白酶、淀粉酶活力较对照组分别提高了24.40％(P＜0.05)、22.01％(P＜0.05)；肝蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力均显著提高(P＜0.05)；幼龟试验组胃蛋白酶活力显著升高，较对照组提高了14.34％(P＜0.05)，后肠淀粉酶、脂肪酶和肝蛋白酶活性分别提高81.85％(P＜0.05)、35.37％(P＜0.05)和150.59％(P＜0.05)；成龟试验组胃蛋白酶活性提高了90.46％，差异极显著(P＜0.01)，胃淀粉酶、脂肪酶活性则分别提高了48.42％(P＜0.05)、27.11％(P＜0.05)，前肠蛋白酶、脂肪酶活力提高了87.21％(P＜0.05)、18.56％(P＜0.05)，后肠蛋白酶和淀粉酶活力分别提高了51.49％(P＜0.05)和65.70％(P＜0.05)。