无创法测量小鼠气道高反应性

摘要

研究背景:我们对于呼吸疾病的认识,大多都是从动物实验中得到的.最典型的一个例子就是,对很多动物包括人类的研究表明,肺的炎症反应与气道的高反应性是有关的.小鼠被广泛的用于呼吸疾病的研究中是有很多优势所决定的,包括:对于小鼠的免疫系统有了一定的认识,大量的试剂可以在小鼠身上使用,小鼠较短的繁殖周期,对于小鼠基因组的充分认识,转基因技术的出现,以及价格便宜等经济方面的优势.然而小鼠的体积决定了测量小鼠肺通气功能需要克服一系列的难题. 目前测量小鼠气道反应性的方法多种多样,从无创到有创,各种方法各有利弊.目前无创测量的最常用的是Penh(enhanced pause)的测定.Penh的测量是将小鼠自由的放置于一容器内,仅测量容器内压力的变化.容器内的压力随着小鼠的呼吸而变化,压力的变化就用来衡量小鼠的肺通气功能,这就最大可能的避免了人为因素对测量结果的影响.但Penh是通过容器压力变化间接反映小鼠气道的反应性,并不是一个直接测定的结果.在进行Penh的测量时,体描箱内压力变化是其基础值,容易受到很多因素如小鼠的运动、小鼠的潮气量、功能残气量以及气体的温度、湿度等的影响.因此,与其说是反映通气功能,不如说Penh反映小鼠的通气模式更为恰当(如呼吸频率、潮气量).以上因素一定程度上限制了Perth反映小鼠通气功能的特异性和准确性.相对于无创法来说,有创法是测量小鼠的肺阻力.测量小鼠肺阻力,需要控制小鼠的呼吸频率、潮气量等参数,因此是目前测量小鼠通气功能最为精确的方法.但是,这种方法对于小鼠的操作较多,需要气管插管等,小鼠在测量时所处的状态与它的自然状态差异很大. 研究目的:在我们成熟的哮喘模型基础上,应用有创和无创的方法,在同一小鼠上测量其气道高反应性(Airway hyperresporlsiveness,AHR),并观察了糖皮质激素地塞米松干预后的AHR改变情况. 研究方法:选择健康雄性的C57BL/6小鼠,6～8周龄,体重18-22g.以卵白蛋白(OVA)作为抗原进行两次腹腔注射致敏和三次雾化吸入激发,建立哮喘模型,同时设立空白对照组(以生理盐水代替OVA),以及地塞米松治疗组(造模程序同OVA组,在OVA激发前每只小鼠腹腔注射溶于0.2ml生理盐水的地塞米松25ug).在造模的第27天行无创测量,第28天进行有创的气道反应性测量. 研究结果: Penh和肺阻力测量结果,无论在不同激发药物之间,还是不同组间,其主效应均存在显著性差异,尤其是激发主效应(P<0.001). Pearson相关性分析结果显示,Penh和肺阻力指标具有良好的正相关性(r=0.545,P<0.001). 结论: 在我们的哮喘模型上,可以用Penh来测定小鼠的气道反应性.糖皮质激素地塞米松干预后的AHR明显下降.

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

小鼠肺通气功能参数的测定

致谢