趋化因子MCP-1在肺结核、HIV合并结核、肺癌患者外周血中的表达及相关机制的研究

摘要

目的：测定肺结核、HIV合并结核、肺癌患者血清和单个核细胞培养上清夜中趋化因子MCP-1的水平，并探讨其在肺结核、HIV合并结核、肺癌患者发病中的作用及临床意义。 方法：从呼吸科住院部筛选初次就诊和复治的结核患者共37例，HIV合并结核8例，肺癌患者35例。结核组，男23例，女14例，年龄19-79岁，平均52.7岁，其中初治型17例，复治型18例，均为经临床X线，痰检阳性或纤维支气管镜毛刷阳性，及抗结核治疗有效且排除其他疾病的结核患者；HIV合并肺结核组，男性5例，女性3例，年龄31-41岁，平均36.7岁；肺癌组，男21例，女14例，年龄45-85岁，平均60.3岁，其中鳞癌12例，腺癌13例，小细胞肺癌10例，均经病理学(纤维支气管镜活检或肺穿刺活检)确诊。正常对照组：2008年1月来本院健康体检的人群，排除其他疾病，血液生化以及影象资料无明显异常者，共20例，男11例，女9例，年龄在20-50岁，平均42.5岁。留取各组病例血清标本，常规离心分离后取上清液，-70℃保存待测。取肝素抗凝静脉血3ml，用淋巴细胞分离液常规分离PBMCs，用含10％小牛血清RPMI1640培养液调细胞浓度为1×106/ml，台盼蓝染色，细胞活力＞95％，种入96孔细胞培养板，加入lug/ml的ESAT6/CFP1010ul，建立复孔，置于37℃5％CO2培养箱中培养。预实验显示培养24h时MCP-1的浓度达到高峰，于此时收集培养上清，-70℃保存，备用。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组标本中MCP-1的浓度和培养上清液中MCP-1的浓度。 结果：结核组血清MCP-1浓度为124.01±11.09pg/ml，其中初治型结核组MCP-1浓度为68.5±3.56pg/ml；复治型结核组MCP-1浓度为141.56±13.71pg/ml；HIV合并结核组血清MCP-1浓度220.6±4.82pg/ml；肺癌组血清MCP-1浓度为104.57±8.94pg/ml，其中鳞癌组为100.36±7.37pg/ml，腺癌组为108.73±5.72pg/ml，小细胞癌组为106.64±6.52pg/ml。正常对照组MCP-1浓度28±8.94pg/ml，结核组血清MCP-1浓度明显高于正常组(P＜0.01)，复治结核组和初治结核组血清中的MCP-1浓度具显著性差异(P＜0.05)；结核组、HIV合并结核组中血清的MCP-1浓度具显著性差异(P＜0.01)；肺癌组明显高于正常对照组(p＜0.01)。各组PBMCs培养上清液中MCP-1的浓度分别为结核组412.65±28.26pg/ml，其中初治型结核组317.55±57.5pg/ml，复治型结核组465.5±40.5pg/ml；HIV合并结核组635.10±18.82pg/ml；肺癌组398.78±77.65pg/ml，其中鳞癌组为367.56±36.78pg/ml，腺癌组为402.73±56.12pg/ml，小细胞癌组为399.72±42.45pg/ml；正常对照组218.25±60.01pg/ml，结核组单个核细胞上清液MCP-1浓度高于正常组(P＜0.01)；复治结核组和初治结核组单个核细胞上清液MCP-1浓度具显著性差异(P＜0.05)；肺癌组单个核细胞上清液MCP-1浓度明显高于正常组(P＜0.01)；HIV合并结核组单个核细胞上清液MCP-1浓度高于结核组，具显著性差异(P＜0.05)；不同病理类型的肺癌血清和单个核细胞上清液MCP-1浓度无显著差异(p＞0.05)。 结论： 1．结核组血清与单个核细胞上清液MCP-1浓度与正常组相比明显升高(P＜0.01)；复治型肺结核血清与单个核细胞上清液MCP-1浓度高于初治型(P＜0.05)；说明MCP-1在结核的致病过程中发挥着重要作用，单个核细胞是MCP-1的来源。 2. HIV合并结核组血清MCP-1浓度高于单纯结核组(P＜0.01)；单个核细胞上清液MCP-1浓度也高于单纯结核组(P＜0.05)。说明MCP-1在HIV合并结核的致病过程中发挥着重要作用，HIV感染合并肺结核组病情更易恶化。 3．肺癌患者血清与单个核细胞上清液MCP-1浓度与正常组相比有明显差异(P＜0.01)。说明MCP-1在肿瘤的发病机制中发挥重要作用。 4．不同病理类型的肺癌血清和单个核细胞上清液MCP-1浓度无显著差(p＞0.05)。说明MCP-1在不同类型的肿瘤中致病机理类似。

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