水稻细菌性条斑病和白叶枯病生防细菌的筛选鉴定与应用研究

摘要

从收集到的Bacillus、Pseudomonas、Enterobacter、Burkholderia四大类共84株细菌中经过室内离体拮抗实验，共筛选到61株对水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola，Xooc)与白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae，Xoo)有拈抗能力的细菌，初步建成了细菌性条斑病与白叶枯病生防菌的资源库；转接5次后有35株仍有拮抗能力；经过温室防病试验和促生、毒性测定，筛选到5株防病效果稳定的菌株：925、927、4812、B7及LW，经菌落形态及细菌学特征测定、脂肪酸(FAME)和16S rDNA分析，分别被鉴定为Burkholderia cenocepacia、Burkholderia cenocepacia、Bacillus amyloliquefaciens、Bacillus amyloliquefaciens与Pseudomonas putida。
　　 以其中防效最为显著的LW为基础研制出一种细菌性条斑病与白叶枯病的生防菌剂。温室和大田实验显示，该生防菌剂对细条病与白叶枯病的防效分别达到83.4％、75.7％与87.6％、75.8％。对菌剂中有效菌含量进行监测表明，室温存放7个月后LW浓度还达到3×107CFU/mL，仍具备发挥防效的条件。该生防菌剂安全、稳定、高效，同时具有制备简单、成本低廉、使用方便等特点，具有极强的应用前景。经生防菌LW预处理过的水稻接种Xooc后，水稻体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性在大部分时间里比未处理过的活性高，表明诱导抗性可能是LW对细条病的防治机制之一；与对照相比，经LW预处理过的水稻接种Xoo后，体内PAL、POD、PPO三种酶的活力改变趋势没有明显规律，初步表明LW诱导水稻白叶枯病抗性效应不显著。

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第1章 文献综述

1.1水稻白叶枯病与细菌性条斑病危害情况

1.2病害症状识别

1.2.1白叶枯病症状

1.2.2细条病症状

1.3病原菌命名演变

1.4白叶枯病与细条病的防治研究现状

1.4.1检疫措施

1.4.2选育抗病品种

1.4.3病害预测预报

1.4.4栽培管理

1.4.5化学药剂处理

1.4.6生物防治

1.5本论文的研究目的和意义

第2章 白叶枯病和细条病生防菌的筛选及鉴定

2.1材料与方法

2.1.1供试菌株

2.1.2培养基

2.1.3拮抗菌的室内平板筛选

2.1.4温室初筛

2.1.5促生作用及毒力测定

2.1.6温室复筛

2.1.7菌落形态及主要细菌学测定

2.1.8拮抗菌电镜观察

2.1.9脂肪酸鉴定(FAMEs)

2.1.10 16S rDNA序列测定

2.2结果与分析

2.2.1室内活菌抑菌初筛及生长情况

2.2.2活菌拮抗能力复筛

2.2.3拮抗菌无菌滤液及死菌抑菌能力

2.2.4温室筛选结果

2.2.5生防菌促生能力及毒力测定

2.2.6生防菌各类群的鉴定

2.3讨论

第3章 白叶枯病和细条病生防菌剂的研制及其活性测定

3.1生防菌剂的配制

3.2生防菌剂的温室防病效果测定

3.3生防菌剂的大田防病效果实验

3.4活性菌的存活力测试

3.5生防菌诱导水稻抗病性

3.5.1取样

3.5.2酶液提取

3.5.3酶活性测定

3.2结果与分析

3.2.1生防菌剂的温室防病效果

3.2.2生防菌剂的大田防病效果

3.2.3生防菌存活力测试

3.2.4防御酶活力测定

3.3讨论

参考文献

作者简历