辛伐他汀对肿瘤坏死因子α及放线菌素D诱导的MG63凋亡的保护作用及可能机制

摘要

目的：:探讨辛伐他汀对肿瘤坏死因子α(TNF-a)及放线菌素D(ActD)诱导的MG63凋亡的影响及可能的作用机制。
　　 方法：:人成骨样细胞(MG63)用DMEM+10％胎牛血清培养,分别用不同浓度的辛伐他汀、TNF-a、TNF-a+ActD作用于MG63,观察对细胞活性的影响,采用合适的浓度诱导细胞损伤,制作凋亡模型,将实验细胞分成5组,对照组,TNF-a+ActD组,另3组采用不同浓度的辛伐他汀(10-7-10-9mol/1)对MG63进行预处理,再加入TNF-a+ActD,用MTs比色法测定各种药物对细胞活性的影响,光镜下观察细胞形态的改变及典型的凋亡小体和细胞碎片,收集凋亡细胞进行蛋白裂解后行western blotting检测细胞凋亡途径。
　　 结果：
　　 (1)TNF-a单独对MG63作用24小时细胞活性无明显减低。
　　 (2)10-7-10-10mol/1浓度的辛伐他汀对MG63作用244小时后细胞活性无明显减低,但高浓度组(10-3-10-5mol/1)。细胞活性明显减低
　　 (3)TNF-a对放线菌素D致敏的MG63细胞有明显的细胞毒作用,随着TNF-a浓度的增加,细胞活性明显减低。
　　 (4)辛伐他汀可以抑制TNF-a/ActD诱导的人成骨样细胞(MG63)凋亡,经辛伐他汀(10-7-10-9mol/1)预处理后再与TNF-a/ActD作用,细胞活性较未加辛伐他汀有明显增加。在一定浓度范围内呈剂量依赖性,10-7mol/1组细胞活性增加较明显。光镜下观察凋亡小体和致密碎片核有明显减少。
　　 (5)辛伐他汀通过激活AKT和抑制NF-KB途径,来抑制TNF-a/ActD诱导的人成骨样细胞(MG63)凋亡。
　　 结论：TNF-a能诱导ActD致敏的MG63细胞发生凋亡,而辛伐他汀则对这种细胞凋亡有明显的拮抗作用,以10-7mol/1作用最明显。辛伐他汀主要是通过激活AKT和抑制NF-KB途径来达到保护作用。