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球孢白僵菌对斜纹夜蛾的高毒菌株筛选及制剂研发

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1 斜纹夜蛾微生物防治的研究现状

1.1 斜纹夜蛾的发生危害和抗药性

1.2 斜纹夜蛾控制的生物技术途径

1.2.1 常规抗虫品种(系)的选育

1.2.2 转基因抗虫植物

1.2.3 微生物防治

1.3 生防真菌的毒力评价

1.3.1 生物测定与毒力指标

1.3.2 生测数据分析

1.4 生防真菌制剂的研制策略

1.4.1 菌种筛选

1.4.2 剂型选择

1.4.3 菌药协同作用

1.5 本研究的内容与目标

2 防治斜纹夜蛾球孢白僵茵菌株的筛选

2.1 材料与方法

2.1.1 供试菌株

2.1.2 供试虫源

2.1.3 孢子粉制备

2.1.4 生物测定

2.1.5 数据分析

2.2 结果与分析

2.2.1 斜纹夜蛾二龄幼虫死亡率

2.2.2 对斜纹夜蛾二龄幼虫的LT50

2.3 讨论

3 球孢白僵菌孢子制剂和贮存技术的改进

3.1 材料与方法

3.1.1 孢子粉生产

3.1.2 孢子粉贮存及质量指标的检测

3.1.3 稳定剂对油剂粘度的影响

3.1.4 油剂中孢子粉沉降速率的测定

3.1.5 乳化剂对油剂乳化效果测定

3.1.6 油剂的贮存及活孢率的测定

3.2 结果与分析

3.2.1 孢子粉及油剂中孢子活孢率变化

3.2.2 孢子粉耐热与UY-B辐射能力的变化

3.2.3 油剂粘度

3.2.4 油剂中孢子粉的沉降速率

3.2.5 乳化剂对孢子油剂的乳化效果

3.3 讨论

4 白僵菌孢子油剂与低剂量抑太保对斜纹夜蛾的协同作用

4.1 材料与方法

4.1.1 供试菌株及其孢子粉的生产

4.1.2 供试虫源

4.1.3 生物测定

4.1.4 数据分析

4.2 结果与分析

4.2.1 孢子沉降量

4.2.2 斜纹夜蛾二龄幼虫死亡趋势

4.2.3 时间·剂量,死亡率模拟

4.3 讨论

5 白僵菌孢子制剂与低剂量抑太保混用的田间防效试验

5.1 材料与方法

5.1.1 供试孢子制剂及药剂

5.1.2 田间试验

5.1.3 田间数据收集

5.1.4 数据分析

5.2 结果与分析

5.2.1 田间孢子沉降量

5.2.2 田间虫口基数

5.2.3 田间虫口密度及温湿度变化

5.2.4 虫口密度减退率及相对防效

5.3 讨论

6 讨论与展望

参考文献

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摘要

斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabric ius)属鳞翅目(Lepidopetra)夜蛾科(Notcudiea),具有食性杂、繁殖力强、暴发快等特点,是一种危害极大的农业害虫。长期以来,斜纹夜蛾依赖于化学防治,抗药性问题十分突出,研究探索斜纹夜蛾微生物防治的新技术是一项紧迫的任务。昆虫病原真菌在害虫生物防治中已被广泛研究和应用,但针对斜纹夜蛾的研究报道还十分有限。本研究以斜纹夜蛾为靶标害虫,筛选了对斜纹夜蛾二龄幼虫高毒力的菌株,优化了基于当选菌株孢子油剂的制剂配方,评价了当选菌株孢子油剂与低剂量抑太保对斜纹夜蛾的协同作用效果,并进行了斜纹夜蛾的田间药效试验。主要内容和结果分述如下:
   对斜纹夜蛾高毒力的球孢白僵菌株筛选比较测定了不同地理和寄主来源的12株球孢白僵菌Beauveria bassiana对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力。用含0.02%吐温80的无菌水将各菌株孢子粉配制成1×108个孢子/mL的高浓度悬液作为处理,以0.02%吐温80作为对照,每处理三次重复,自动喷塔喷雾接种到斜纹夜蛾二龄幼虫上,孢子沉降量为2500(2132-2807)个孢子/mm2,因菌株而异。幼虫接种后在在25℃和12L:12D条件下用甘兰叶片饲养,连续7天逐日定时观察记录死亡率,病死虫尸保湿培养。各接菌处理在第7天的累计校正死亡率为33.9‰82.4%,不同菌株之间差异显著(P<0.01),但同一菌株的各重复之间无显著差异(P>0.05)。其中,诱发幼虫死亡率最低的菌株为Bb2336和Bb4535,分别为33.9%(+1.1%)和33.9%(+5.9%),而毒力最高的Bb2860菌株诱发幼虫死亡率高达82.4%(+6.O%)。此外,生测中的大多数虫尸在保湿培养的1~3天内都能长出菌丝,并在体表产生分生孢子。
   球孢白僵菌孢子制剂和贮存技术的改进将球孢白僵菌Bb2860菌株的高纯度孢子粉分别贮存于4℃和25℃下,孢子油剂贮存于25℃下。每月定期检测孢子粉活孢率、耐热能力和耐紫外辐射能力,油剂则只检测孢子活孢率,持续贮存检测18个月。结果表明,孢子粉贮存期间的活孢率在不同温度处理及不同贮存期之间差异极显著。在25℃下贮存的孢子粉与油剂的活孢率也差异显著。在第12个月时,贮存于4℃下的孢子活孢率为85%,贮存于25℃的孢子粉活孢率几乎降为0,而此时油剂中活孢率仍维持在66%。同时,25℃下贮存的孢子粉耐热能力和耐UV-B紫外辐射能力均比4℃贮存的孢子粉下降更快。两因素方差分析表明,孢子粉耐热能力和耐辐射能力在4

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