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摘要
前言
1 文献综述
1.1 植物花粉发育
1.1.1 花粉发育过程
1.1.2 花粉壁
1.1.3 绒毡层发育
1.2 植物的授粉受精
1.2.1 花粉黏附
1.2.2 花粉水合
1.2.3 花粉萌发和花粉管生长
1.3 成熟花粉粒中mRNA的储运
1.4 表观遗传
1.4.1 组蛋白甲基化
1.4.2 组蛋白甲基化是一种可逆的修饰
1.4.3 组蛋白去甲基化
1.4.4 含有JmjC域的组蛋白去甲基化酶在植物花发育中的作用
2 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcJMJ30的序列与表达分析
2.1 材料与方法
2.1.1 植物基因组DNA、总RNA的提取及cDNA的合成
2.1.2 目的基因cDNA编码区的获得
2.1.3 目的基因cDNA非编码区的获得
2.1.4 目的基因DNA序列全长的获得
2.1.5 序列特征分析
2.1.6 分子进化树的构建
2.1.7 基因时空表达模式分析
2.2 结果与分析
2.2.1 目的基因cDNA全长的获得
2.2.2 目的基因DNA全长的获得
2.2.3 目的基因核苷酸及氨基酸序列分析
2.2.4 进化分析表明目的基因与拟南芥JMJ30亲缘关系密切
2.2.5 BcJMJ30在白菜‘Bajh97-01A/B’中的时空表达模式
2.3 讨论
2.3.1 白菜BcJMJ30组蛋白去甲基化酶的特性
2.3.2 白菜BcJMJ30参与花粉发育和授粉受精
3 白菜组蛋白去甲基化酶基因BcJMJ30的功能分析
3.1 材料与方法
3.1.1 反义RNA载体的构建
3.1.2 反义表达载体对菜心的遗传转化
3.1.3 转基因植株的分子检测
3.1.4 转基因植株开放花形态观察
3.1.5 转基因植株花粉发育的扫描电镜观察
3.1.6 转基因植株花粉生活力观察
3.1.7 转基因植株的花粉萌发试验
3.2 结果与分析
3.2.1 BcJMJ30反义RNA载体的构建
3.2.2 获得转反义BcJMJ30菜心植株
3.2.3 转反义BcJMJ30菜心植株的分子检测
3.2.4 转反义BcJMJ30菜心植株形态特征观察
3.2.5 转反义BcJMJ30菜心植株花粉的细胞学观察
3.2.6 转反义BcJMJ30菜心植株的花粉生活力观察
3.2.7 转反义BcJMJ30菜心植株的花粉萌发试验
3.2.8 转反义BcJMJ30菜心植株的结荚情况观察
3.3 讨论
4 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcMF22的序列与表达分析
4.1 材料与方法
4.1.1 植物材料
4.1.2 目的基因cDNA编码区的获得
4.1.3 目的基因cDNA非编码区的获得
4.1.4 目的基因DNA序列全长的获得
4.1.5 序列特征分析
4.1.6 目的基因时空表达模式分析
4.2 结果与分析
4.2.1 获得目的基因的cDNA与DNA全长
4.2.2 目的基因核苷酸与氨基酸序列分析
4.2.3 BcMF22在白菜‘Bajh97-01A/B’中的时空表达模式
4.3 讨论
5 白菜花粉发育与授粉受精相关基因BcMF22的功能分析
5.1 材料与方法
5.1.1 反义RNA载体的构建
5.1.2 转基因植株的获得
5.1.3 转基因植株的分子检测
5.1.4 转基因植株花粉生活力观察
5.1.5 转基因植株的花粉萌发试验
5.2 结果与分析
5.2.1 BcMF22反义RNA载体的构建
5.2.2 获得转反义BcMF22菜心植株
5.2.3 转反义BcMF22菜心植株的分子检测
5.2.4 转反义BcMF22菜心植株花粉生活力观察
5.2.5 转反义BcMF22菜心植株的花粉萌发试验
5.2.6 转反义BcMF22菜心植株结荚情况观察
5.3 讨论
结论
参考文献
博士期间发表的论文