鲜食葡萄新品种‘鄞红’的遗传分析及其生物学特性研究

摘要

葡萄是葡萄科(Vitaceae)葡萄属(Vitis L.)植物，是世界主要水果之一。我国以鲜食葡萄生产为主，其产量居世界第一位，浙江省为我国南方鲜食葡萄的主要产地之一。本论文以45个主要栽培葡萄品种为材料，采用ISSR分子标记技术对其亲缘关系及遗传多样性进行分析，旨在为葡萄杂交育种和产业健康、持续地发展提供理论指导;‘鄞红’为浙江省优良鲜食葡萄品种，2011年通过品种审定，选择与‘鄞红’葡萄遗传相似度较高的巨峰和藤稔为对照，从物候期、生长结果特性、抗病性、果实品质、光合特性和产量等方面进行了品种对比试验。主要研究结果如下:
　　 (1)用改良后的CTAB法制备的DNA无凝胶状物质、蛋白质和酚类物质，适合ISSR-PCR扩增。
　　 (2)确定了适合本试验葡萄样品的ISSR反应的体系为:10×buffer(含Mg2+)2.0μl，模板DNA为2.5ng/μl，Taq DNA聚合酶1U，dNTPs0.2mM，引物0.2μM，总体积为20μl。ISSR反应扩增程序为:94℃预变性5min，94℃变性45s，50-60℃退火1min，72℃延伸1.5min，进行40个循环，最后72℃延伸7min，4℃保存。
　　 (3)从100条引物中筛选出了26条带型清晰、重复性高、多态性较好的引物，对45个葡萄品种进行PCR扩增，结果表明:共扩增出310条带，其中多态性条带283条，多态性位点百分率为91％。扩增条带最少的是UBC814，为3条，最多的为UBC857，达23条，平均带数为12条，且引物扩增长度在200-2000bp之间。多态性百分率最高的引物为UBC880、UBC814、UBC817、UBC824、UBC827、UBC834、UBC855、UBC857和UBC809，均达100％，最低的是UBC826，为75％。
　　 (4)利用NTsys2.10e软件计算45个葡萄品种的遗传相似系数，其变化范围在0.603-0.908之间。利用UPGMA法构建聚类树状图。在相似系数为0.756处将45个供试品种分为两个类群，欧亚种群和欧美杂种群。第一类欧亚种群包含金手指、白鸡心、金田玫瑰、秦龙大穗等25个品种;第二类欧美杂种群由超红、巨玫瑰、瑰香怡等20品种组成。新品种‘鄞红’与巨峰和藤稔的遗传相似度较高，美峰和美秋与宇选4号的遗传相似系数分别为0.902和0.898，推测二者可能属于欧美杂种。
　　 (5)‘鄞红’品质优良，果粒大小均匀，很少出现小果粒现象，果穗整齐，着色均匀。果肉硬度较高，采后果穗不容易落粒，不易变质，贮藏性能好，果实含糖量高，营养丰富，口味纯正，树势强，坐果率高，丰产稳产，栽培管理容易，果实品质、光合特性及抗病性均优于巨峰和藤稔，有广阔的发展前景。

目录

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致谢

摘要

缩略语表

第一章 文献综述

1 葡萄栽培研究现状与进展

1．1 世界葡萄栽培现状

1．2 国内葡萄栽培现状

1．3 浙江省葡萄生产现状

1．4 浙江省葡萄生产存在的问题

2 分子标记在葡萄种质资源研究中的应用

2．1 ISSR标记

2．2 其他分子标记技术

2．3 分子标记在葡萄种质资源研究中的应用

3 本研究目的与意义

第二章 葡萄种质资源遗传多样性的ISSR分析

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 试验方法

2 结果分析

2．1 DNA提取质量检测

2．2 ISSR引物筛选及最佳退火温度的确定

2．3 多态性分析

2．4 聚类分析

3 讨论

3．1 葡萄基因组DNA的提取

3．2 PCR反应的影响因素

3．3 品种遗传多样性及亲缘关系分析

4 结论

第三章 葡萄新品种‘鄞红’生育特性、品质特征与高产栽培要点

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验地点基本情况

1．3 试验方法

2 结果分析

2．1 物候期及生长特性分析

2．2 抗病性分析

2．3 果实品质

2．4 光合特性分析

2．5 丰产性调查

3 ‘鄞红’栽培技术要点

3．1 园地的选择

3．2 整地

3．3 密度

3．4 架式和修剪

3．5 肥水管理

3．6 病虫防治

3．7 产期调节技术

3．8 主要繁殖技术

4 结论

4．1 鄞红、巨峰和藤稔的植物学特征比较

4．2 鄞红、巨峰和藤稔的果实生长发育期比较

4．3 ‘鄞红’的商业性评价

参考文献