腺病毒介导的脑源性神经营养因子对大鼠脊髓急性损伤后神经细胞保护的研究

摘要

背景:脊髓损伤分为原发性损伤和继发性损伤，原发性损伤是受伤瞬间对脊髓造成的不可逆损伤，很少有脊髓损伤是对脊髓的直接物理性横断，大多是挫伤、压迫或者牵拉造成的损伤，所以仍有部分脊髓是完好的，这就给恢复神经功能提供了可能。既往的研究表明，脊髓损伤后局部神经营养因子不足是脊髓损伤后修复面临的主要问题之一。在这些研究中，脑源性神经营养因子(BDNF)的作用尤为瞩目。
　　目的:本研究将以脊髓损伤SD大鼠为模型，通过导入腺病毒介导的脑源性神经营养因子(Adv-BDNF)，上调大鼠BDNF基因的表达，并最终达到修复神经细胞、改善大鼠运动功能的目的。
　　方法:将实验大鼠分为G1-4组，其中G1-3组手术创建大鼠急性脊髓压迫损伤模型，G4组为假手术组。脊髓损伤模型建立后，于G1组大鼠损伤节段头端5mm处注射Adv-BDNF，G2组大鼠同样位置注射Adv-eGFP，G3组大鼠注射PBS做为对照。于术后1、3、7、14、28天取各组脊髓标本，通过检测BDNFmRNA及蛋白评价BDNF表达情况，标本行染色镜检评价组织损伤程度。同时通过行BBB评分评价大鼠运动功能恢复情况。
　　结果:术后3天取G2组脊髓切片镜检，见GFP散布整个头端脊髓，提示腺病毒基因逆行调控满意。PCR及western blot结果提示在对照组(G3)中，BDNF的表达在伤后24h就显著增加，但是3天后即减少，而且，这种BDNF的低表达状态持续时间长达1星期。在实验组1(G1)中，因损伤导致的BDNF表达下调较对照组(G3)要小很多，并且在第2星期和第4星期有明显的恢复表现。在术后1星期时，G1组的BDNF表达明显高于G2组，而且无论是G1还是G2组均表现出比对照组(G3)更高的BDNF表达。G1组的标本在光镜下观察到的空腔较对照组(G3)要小，G2组在术后4周时观察到的空腔最小，但是G1组的正常脊髓实质较G2组更多。BBB评分的结果表明，所有实验动物的BBB评分均表现出了逐步好转的迹象，在术后第7，14，28天时， G1组的BBB评分较G2组和对照组(G3)更高。
　　结论:1、使用腺病毒介导的BDNF可以在大鼠的SCI模型中上调BDNF表达。
　　2、在大鼠SCI中，上调BDNF表达有助于大鼠的神经组织修复及运动功能恢复。