早产儿脐带血中内皮祖细胞的数量及功能分析

摘要

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是内皮细胞的前体细胞，具有高增殖潜能，不仅参与胚胎期的血管发生，在成人的血管新生中也发挥重要作用。在成人心血管疾病中的研究已较多，但在新生儿方面的研究较少。Sugawara等[1]发现孕妇外周血中的EPCs数量随孕期的增加而增多，表明EPCs可能在维持妊娠期胎盘发生和血管新生方面发挥重要作用。Acosta等[2]发现妊娠期糖尿病的孕妇血中EPC减少，产后脐带血中EPC也减少;提示孕期外周血EPCs数量和功能的变化可能反映某种病理妊娠状态。Baker等[3-6]研究发现早产儿脐带血中的EPC数量比足月儿中的高，发现患支气管肺发育不良的新生儿脐带血中内皮祖细胞是减少的。Machali(n)ska等[7]发现患ROP的早产儿脐带血中EPC数量明显增加。以上说明孕妇或新生儿患病会有相应的内皮祖细胞会出现变化。为此我们通过研究早产儿和足月儿脐带血内皮祖细胞数量的差异,明确是否能为胎儿疾病的预测、病情严重程度的评估等方面提供理论数据。
　　目的:
　　探讨早产儿及剖宫产儿脐带血中的内皮祖细胞的数量变化，为早产儿、剖宫产儿易患疾病提供理论依据。
　　方法:
　　自2012年10月至2013年9月收集早产儿脐带血13例（均为单胎，胎龄30～36周，剖宫产6例，顺产7例，男6例，女7例）。收集足月儿脐带血24例（均为单胎，胎龄37～43周，剖宫产13例，顺产11例，男14例，女10例）。(1)产妇分娩后出生10分钟内采集脐带血标本1 ml置于肝素抗凝管内低温保存。(2)于3小时内处理好上机检测。采用流式细胞分析仪检测EPC。
　　具体步骤:(1)取100μl抗凝脐带血，加入10μl CD133-PE抗体及10μlVEGFR-2-APC抗体，震荡后室温避光孵育20分钟。(2)加入1ml溶血素，震荡后室温避光5min。(3)1500rpm离心5min，弃上清液。(4)加入1ml PBS，震荡后1500rpm离心5min，弃上清液。(5)加入0.5mlPBS中，放到流式细胞仪中检测。用流式细胞仪分别检测早产儿和足月儿脐带血的内皮祖细胞。
　　结果:
　　早产儿组脐带血EPC占单个核细胞的百分数为0.013％±0.0124％;足月儿组脐带血EPC占单个核细胞的百分数为0.0036％±0.0025％;两组间差异比较有显著的统计学意义(t=3.614，P=0.001)。足月剖宫产组脐带血EPC占单个核细胞的百分数为0.0027％±0.0020％，足月顺产组脐带血EPC占单个核细胞的百分数为0.0048％±0.0026％，两组差异有统计学意义(t=2.226，P=0.039)。足月儿男婴组和女婴组脐带血内皮祖细胞占单个核细胞的百分数分别为0.0042％±0.0024％，0.0036％±0.0030％，两组差异无明显统计学意义(t=0.590，P=0.477)。早产儿剖宫产和顺产组脐带血内皮祖细胞占单个核细胞的百分数分别为0.0126％±0.0159％，0.0134％±0.0097％，两组差异无明显统计学意义(t=0.104，P=0.920)。早产儿男婴组和女婴组脐带血内皮祖细胞占单个核细胞的百分数分别为0.0134％±0.0157％，0.0126％±0.010％，两组差异无明显统计学意义(t=0.108，P=0.917)。
　　结论:
　　证实了早产儿脐带血EPC数量高于足月儿，这是早产儿、剖宫产儿易患疾病的基础，为利用EPC治疗相关疾病提供理论依据。但目前不能明确为早产儿或剖宫产儿易患疾病做出预测，尚不能对病情严重程度的评估等方面提供理论数据。有待进一步的研究。

目录

声明

致谢

摘要

1 引言

2 资料与方法

2．1 研究对象与分组

2．2 方法

2．3 统计学分析

3 结果

3．1 EPC与产前指标的相关性分析

3．2 多因素线性回归分析

3．3 对Group(早产儿、足月儿)和性别做双因素方差分析

3．4 对Group(早产儿、足月儿)和分娩方式做双因素方差分析

3．5 早产儿组与足月儿组的脐带血中EPC检测结果比较

3．6 足月顺产组与剖宫产组的脐带血中EPC检测结果比较

3．7 足月儿男婴组与女婴组的脐带血中EPC检测结果比较

3．8 早产顺产组与剖宫产组的脐带血中EPC检测结果比较

3．9 早产儿男婴组与女婴组的脐带血中EPC检测结果比较

4 讨论

5 结论

参考文献

内皮祖细胞在新生儿疾病中的研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果