血管生成素在结直肠癌中的表达水平及其临床意义分析

摘要

目的：
　　血管生成素（Angiogenin，ANG）是第一个从肿瘤细胞培养液中分离和纯化的促血管生成因子，在肿瘤的发生、发展中扮演重要的角色。ANG具有促肿瘤血管新生和肿瘤细胞增殖的双重活性，是肿瘤诊断和肿瘤治疗的理想靶标。然而，目前关于ANG表达水平与结直肠肿瘤各种临床指标之间相关性的研究较少，且已有研究主要集中在检测结直肠癌组织ANG的mRNA表达水平和患者血清ANG含量方面。本学位论文基于临床病理样本，分析ANG在人结直肠癌及其癌旁组织中的表达水平，评价ANG表达与结直肠癌临床指标（包括患者年龄和性别、癌组织肿瘤大小和类型、AJCC临床分期以及病理分级）之间的相关性，探讨其作为结直肠癌肿瘤生物标志物的可能性。
　　方法：
　　利用免疫组织化学染色方法对结直肠癌组织芯片（结、直肠癌及其癌旁组织各75对，共300例）进行ANG蛋白染色，并对结直肠癌与其癌旁组织的腺上皮细胞外间质（Extracellular matrix，ECM）、细胞质（Cytoplasm）和细胞核(Nuclear)中ANG表达水平进行病理学评分。采用边际一致性检验对结直肠癌与其癌旁组织中ANG的表达水平进行比较分析;采用Pearson x2检验分析ANG表达水平与患者年龄、性别以及癌组织肿瘤大小、肿瘤类型之间的相关性，采用Spearman秩相关检验分析ANG表达水平与AJCC临床分期、病理分级临床指标的相关性;采用wilcoxon符号秩检验分析结直肠癌与其癌旁组织中ANG的表达变化情况（即癌其癌旁ANG染色强度等级的差值指标“NGCancer-ANGAdjacent”，ANGC-A），并采用Pearson x2检验或Spearman秩相关检验分析ANGC-A与各临床指标之间的相关性。
　　结果：
　　(1)相比于癌旁组织，ANG在结直肠癌中整体表达水平上调，且差异存在统计学意义(P＜0.001)。但是，其表达水平具有位置差异性:与癌旁相比，ANG在结直肠癌腺上皮细胞的细胞外间质中表达水平降低，然而在结直肠癌腺上皮细胞质和细胞核中表达水平上升。
　　(2) ANG在结直肠癌中的整体表达水平与肿瘤部位（结、直肠癌）(P＜0.001)、病理分级（P=0.001）具有相关性，而与其它临床指标之间均无相关性（P＞0.05）。
　　在结肠癌中，ANG在细胞外间质中的表达水平随病理分级的升高呈降低趋势，但无统计学意义（P＞0.05）;在细胞质中，ANG表达水平与肿瘤病理分级之间无相关性（P＞0.05）;在细胞核中，ANG表达水平随病理分级的升高呈上升趋势，且具有统计学意义(P=0.007)。
　　在直肠癌中，ANG的表达水平与各临床指标均无相关性（P＞0.05）。
　　(3)我们进一步以癌与其癌旁ANG染色强度等级的差值为指标（ANGCancer-ANGAdjaent，ANGC-A），分析150对结直肠癌与其癌旁组织ANG的差异表达情况，结果显示:随着结直肠癌组织AJCC临床分期和病理分级等级的升高，细胞外间质中ANGC-A下调的病例数增多，而细胞质和细胞核内ANGC-A上调的病例数增多。
　　结论：
　　(1) ANG在结直肠癌中的表达水平高于其癌旁组织，且与结直肠癌患者恶性程度呈正相关。
　　(2)在癌旁组织中，ANG蛋白主要分布于细胞外间质中;然而，在癌组织中，ANG蛋白主要分布于细胞质与细胞核中。
　　(3) ANG在结肠癌中的表达水平高于直肠癌。在结肠癌中，细胞核内ANG表达水平与患者肿瘤的病理分级和AJCC临床分期存在相关性，但直肠癌组织各区域中，ANG表达水平与患者的临床指标之间无相关性。
　　综上，ANG是结肠癌潜在的肿瘤标志物。