不同人群肠道肺炎克雷伯菌毒力及耐药情况研究

摘要

目的:研究住院患者、肠道门诊腹泻患者、健康体检者三个不同人群肠道中肺炎克雷伯菌的携带状况、毒力基因、耐药性及其分子流行病学特点。
　　方法:采集三个目标人群新鲜粪便标本接种于培养基上，应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flightMass Spectrometr，MALDI-TOF MS）Vitek MS质谱仪鉴定筛选出肺炎克雷伯菌，拉丝试验检测高粘液表型，K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验;合成特异性引物对肺炎克雷伯菌株进行荚膜血清型（K1，K2，K5，K20，K54，K57）和相关毒力基因（wcaG，rmpA，magA和菌素）检测;PCR扩增广谱β-内酰胺酶基因、超广谱β-内酰胺酶基因、质粒介导的AmpC酶基因和碳青霉烯类耐药基因;扩增7对管家基因（rpoB，gapA，infB，gpi，PhoE，rpoB，tonB）对菌株进行多位点序列分型。
　　结果:141株肺炎克雷伯菌分离自住院患者（54/125，携带率43.2％）、腹泻的门诊患者（44/257，携带率17.1％）和健康体检者（43/141，携带率30.5％）。共检测到49株产毒株，其中35株为高粘液表型菌株。K1型菌株检出14株(14/141，9.9％)，K2型菌株检出15株(15/141，10.6％)，K20和K57较少检出，而K54型菌株未检出;菌素基因检出率最高(30.5％)，rmpA次之(19.9％)，wcaG和magA检出率相对较低（分别为12.1％和9.9％）。健康体检者携带的肺炎克雷伯菌毒力检出率最高，其中K1/K2荚膜血清型、wcaG、rmpA、magA和菌素检出率显著高于住院患者来源的菌株，而对抗生素较敏感。住院患者携带的菌株抗生素耐药率最高，头孢菌素类抗生素耐药率大于30％，碳青霉烯类抗生素耐药率22.2％。肺炎克雷伯菌非产毒株抗生素耐药率显著高于产毒株，此外还检测到3株同时携带毒力基因和耐药基因的菌株（magA+K1+blaSHV-2，菌素+blaTEM-1+blaKPC-2，菌素+wcaG+blaCTX-M-14+ blaSHV-1）。产毒株和非产毒株的序列基因型(ST)分布呈现不同的特点，非产毒株较为分散，而产毒株相对较为集中，ST23、ST86为其主要的ST型。ST23菌株均为K1荚膜血清型，ST65和ST86菌株均为K2型。
　　结论:肺炎克雷伯菌在住院患者中携带率最高，毒力较低而抗生素耐药率最高;而健康人群携带较高比例的产毒株;产毒株比非产毒株对抗生素敏感性更高;特定的ST与毒力有一定的关联;健康人群携带肝脓肿流行克隆菌株，提示肝脓肿菌株来自胃肠道。

目录

声明

致谢

摘要

引言

1．材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2．结果

2．1 菌株分离

2．2 毒力基因检出情况

2．3 拉丝试验结果

2．4 抗生素敏感性试验结果

2．5 耐药基因检测

2．6 MLST分型

3．讨论

4．结论

参考文献

综述 肺炎克雷伯菌感染流行现状、毒力及耐药性的研究进展

个人简历