结直肠癌组织胰岛素样生长因子-1表达与肿瘤淋巴管生成的相关性研究

摘要

目的:
　　探讨IGF-1在结直肠癌组织中的表达模式，并分析其与结直肠癌淋巴管生产及淋巴转移的的关系及临床意义。
　　方法:
　　选取均经病理证实，手术切除的人体结直肠癌标本40例，取肿瘤及癌旁正常组织，每个样品被分为2个部分，其中一个置于10％福尔马林，石蜡包埋切片并进行免疫组织化学分析，另一部分用于提取miRNA。分析IGF-1在各自组织中的表达模式及相互关系。
　　结果:
　　IGF-Ⅰ/IGF-ⅠR的表达量，在癌旁正常组织中分别为1.40±0.59，1.30±1.18，在肿瘤组织中分别为4.53±2.50，4.65±2.66，IGF-Ⅰ/IGF-Ⅰ R两组的比较有统计学差异(P＜0.05)。IGF-Ⅰ/IGF-ⅠR在不同分化组织中的表达量，高分化组中分别为3.00±1.41，2.11±0.93，中分化组中分别为4.30±2.64，4.55±2.35，低分化组中分别为6.18±2.09，6.64±2.11，各组的比较均有统计学差异(P＜0.05)。IGF-Ⅰ/IGF-Ⅰ R在有淋巴结转移组织中的表达量分别为3.12±1.54，3.52±2.18，在无淋巴结转移组织中的表达量分别为6.87±1.99，6.33±2.23，两组的比较有统计学差异(P＜0.05)。结直肠癌组织中淋巴管计数值为11.45±3.03，癌旁组织为3.25±1.28，两组有统计学差异(P＜0.05)，淋巴结转移组肿瘤组织淋巴管计数为12.67±4.09，无淋巴结转移组肿瘤组织中淋巴管计数为10.72±1.90，两组有统计学差异(P＜0.05)。在迁移和侵袭实验中，IGF1处理组LoVo细胞迁移数为(196.4±21.6)，穿膜数为(163.6±19.4)，显著高于对照组(96.4±11.2)，和(72.5±9.1)，差异有统计学意义(P＜0.01)。IGF1对对裸鼠移植瘤生长的影响上，IGF1处理组肿瘤体积和重量分别为983.6±124.7和2.2±0.6，对照组为781.4±97.1，1.8±0.6，两组有统计学差异(P＜0.05)。IGF1对对裸鼠移植瘤LVD的影响上，IGF1处理淋巴管计数为10.7±3.3，生理盐水组为6.4±2.9，两组有统计学差异(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.在结直肠癌组织中，IGF1/IGF1R可以通过诱导淋巴管生成，促进淋巴转移。
　　2.IGF1/IGF1R和let-7 miRNA之间存在负反馈调节关系，let-7 miRNA通过与IGF1/IGF1R之间相互作用，间接对淋巴生成也有一定影响。IGF1/IGF1R和let-7miRNA的这种负反馈调节关系也可以为临床抗肿瘤淋巴管生成治疗提供新的线索。
　　3.IGF-Ⅰ/IGF-Ⅰ R在肿瘤发生发展过程中，具有多种重要作用，在结直肠癌诊断、预后判断及治疗决策上具有重要价值。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词表

前言

1 研究对象

1．1 病例纳入标准

2 主要的仪器设备和试剂

2．1 主要的仪器设备

2．2 主要的试剂

3 研究方法

3．1 免疫组织化学分析

3．2 细胞培养

3．3 IGF1处理

3．4 let-7e处理

3．5 细胞迁移和侵袭能力分析

3．6 裸鼠动物模型的制备和干预

3．7 淋巴管密度测定

3．8 Western blot分析

3．9 miRNA的提取和Real-time RT-PCR分析

3．10 细胞增殖检测

3．11 细胞凋亡检测

3．12 统计学处理

4 结果

4．1 IGF-1和IGFR1免疫组化染色

4．2 临床组织标本巴管计数

4．3 IGF1对细胞迁移和侵袭能力的影响

4．4 IGF1对对裸鼠移植瘤生长的影响

4．5 IGF1对对裸鼠移植瘤LVD的影响

4．6 针对IGF1R的miRNA预测和结直肠癌let-7 miRNA的下调表达

4．7 let-7e下调IGF1R的表达

4．8 let-7e促进CRC细胞凋亡和抑制增殖、迁移和侵袭

4．9 let-7e抑制Akt的活化

4．10 microRNA let-7e和IGF1／IGF1R之间的负反馈调节

5 讨论

6 结论

参考文献

原始资料

综述 结直肠癌淋巴管生成和淋巴转移的研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果