紫苏叶提取物的降血糖活性研究

摘要

近年来，随着社会的发展和人们生活方式的改变，糖尿病的发病率在全球范围内呈上升的趋势，严重威胁着人类的健康。目前主要采用降血糖药物和注射胰岛素的方式治疗，但会引发一些副作用，所以开发利用天然的抗糖尿病药物显得尤为必要。紫苏在我国已有2000多年的栽培历史，主产于贵州、江苏、安徽、湖南等地，具有极为广泛的资源。近些年来，紫苏叶因其特有的活性物质及营养成分，成为一种倍受世界关注的多用途植物，经济价值很高。研究表明，紫苏叶提取物能在糖尿病综合症治疗中起到重要作用，但是目前关于发挥这些功效的活性组分及其作用机理尚无明确的定论。本课题对紫苏叶提取物的降血糖作用和相关机理进行了初步的研究。
　　本文首先探讨了紫苏叶的热水浸提工艺，通过单因素实验和响应面实验来研究浸提温度、浸提时间、料液比、浸提次数等因素对紫苏叶中降血糖活性成分得率的影响，以确定紫苏叶中降血糖活性成分最佳的浸提工艺。结果表明在浸提温度为52℃，浸提时间为60min，料液比为1∶25，浸提次数为3次时，紫苏叶中降血糖活性成分的得率最高。
　　其次，比较了紫苏叶提取物和阿卡波糖对不同来源的α-葡萄糖苷酶的抑制作用，结果表明紫苏叶提取物对猪胰肠来源的α-葡萄糖苷酶、大米来源的α-葡萄糖苷酶及酵母来源的α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用，对细菌来源的α-葡萄糖苷酶没有表现出抑制活性。在此基础上，测定了紫苏叶提取物对不同来源的α-葡萄糖苷酶的抑制类型，实验结果反应紫苏叶提取物对猪胰肠来源的α-葡萄糖苷酶、酵母来源的α-葡萄糖苷酶和大米来源的α-葡萄糖苷酶的抑制类型均属于竞争性抑制类型。
　　最后，采用了Caco-2细胞单层模型来考察样品对小肠中葡萄糖转运的影响，通过考察紫苏叶提取物对Caco-2细胞上双糖酶活力的影响以及紫苏叶提取物对葡萄糖在Caco-2细胞中转运的抑制情况来探讨紫苏叶提取物降血糖机制。结果表明紫苏叶提取物对Caco-2细胞上的麦芽糖酶和蔗糖酶有良好的抑制作用，并且对葡萄糖的转运有一定的抑制作用。

目录

声明

摘要

1．1 糖尿病

1．1．1 糖尿病的主要类型

1．1．2 2型糖尿病的影响因素

1．1．3 2型糖尿病发病的机制

1．1．4 糖尿病的治疗现状

1．2 天然产物降血糖成分

1．2．1 皂苷类

1．2．2 多糖

1．2．3 黄酮类

1．2．4 萜类

1．2．5 生物碱

1．2．6 硫键化合物

1．2．7 不饱和脂肪酸

1．2．8 蛋白质和氨基酸

1．3．2 α-葡萄糖苷酶抑制剂的临床应用

1．3．4 α-葡萄糖苷酶抑制剂的来源和制备

1．4 紫苏

1．4．1 概述

1．4．2 营养成分

1．4．3 功能成分

1．4．4 保健功能

1．5 研究背景和意义

1．6 研究内容

第二章 响应面法优化紫苏叶降血糖活性成分的提取工艺研究

2．1 材料与仪器

2．1．1 材料和试剂

2．1．2 实验仪器

2．2 试剂的制备

2．2．1 紫苏叶样品的制备

2．3．1 抑制α-葡萄糖苷酶活性测定方法

2．3．2 紫苏叶的提取工艺

2．3．3 单因素实验

2．3．4 提取响应曲面法试验

2．4 结果与讨论

2．4．1 单因素实验结果

2．4．2 热水提取紫苏叶中降血糖活性物质的响应面实验

2．4．3 验证试验

2．5 小结

第三章 紫苏叶提取物对不同来源的葡萄糖苷酶的影响

3．1 材料与仪器

3．1．1 材料和试剂

3．1．2 实验仪器

3．2 试剂的制备

3．2．1 紫苏叶提取物粉末的制备

3．2．2 紫苏叶提取物溶液的制备

3．2．3 阿卡波糖溶液配制

3．2．4 磷酸钾缓冲溶液(1M，pH7．0)

3．2．5 PNPG溶液的配制

3．3 紫苏叶提取物对不同来源的α-葡萄糖苷酶的作用研究

3．3．4 对细菌来源的α-葡萄糖苷酶抑制作用

3．4．2 对大米来源的α-葡萄糖苷酶的抑制动力学实验

3．4．4 对细菌来源的α-葡萄糖苷酶的抑制动力学实验

3．5 数据处理

3．6 结果与讨论

3．6．1 紫苏叶提取物及阿卡波糖对不同来源的α-葡萄糖苷酶的抑制作用

3．6．2 紫苏叶提取物抑制不同来源的α-葡萄糖苷酶的IC50值

3．6．3 紫苏叶提取物对不同来源的α-葡萄糖苷酶的抑制动力学实验

3．7 小结

第四章 紫苏叶提取物对Caco-2细胞跨膜转运的影响

4．1 实验材料与仪器

4．1．1 实验细胞株

4．1．2 药品与试剂

4．1．2 实验仪器

4．2 实验试剂的配制

4．3 实验方法

4．3．4 Caco-2细胞的冻存

4．3．6 Caco-2细胞的单层模型的完整性评价

4．3．7 MTT法评价药物对Caco-2细胞的细胞毒性

4．3．8 葡萄糖氧酶法测定葡萄糖含量

4．3．10 紫苏叶提取物对葡萄糖在Caco-2细胞中转运的影响

4．4 数据处理及分析

4．5 结果与分析

4．5．1 Caco-2细胞单层完整性评价

4．5．2 细胞毒性试验

4．5．3 紫苏叶提取物对Caco-2细胞的双糖酶的酶活力影响

4．5．4 紫苏叶对葡萄糖在Caco-2细胞中跨膜转运的影响

4．6 小结

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

致谢

个人简介

攻读硕士学位期间发表论文