参附注射液对猪创伤性心脏骤停复苏后多脏器功能损伤的保护作用

摘要

目的: 研究早期应用参附注射液(Shenfu injection，SFI)对猪创伤性心脏骤停(Traumatic cardiac arrest，TCA)复苏后多脏器功能损伤的保护作用及可能机制。 方法: 国产健康雄性白猪21头，体重33.1±3.6kg。采用随机数字表法分为假手术组Sham组(n=5)、TCA组(n=9)及SFI组(n=7)。Sham组只经历气管插管及动静脉置管过程，不进行放血和心肺复苏(Cardiopulmonary resuscitation，CPR)。TCA组和SFI组在20min内匀速释放总血容量的40％，然后经电刺激法诱发室颤5min、CPR5min。于CPR开始时，进行液体复苏，即在1h输入60％自体血容量的晶体液后，1h回输入50％所释放的血液。SFI组在TCA组的基础上于复苏后5min静脉注射SFI1.0ml/kg，然后以1ml/kg的总量微泵维持6h。于基线、复苏后1、3、6h监测心率(Heart rate，HR)、平均动脉压(Mean arterial pressure，MAP)，采集动脉血检测动脉血乳酸(Lactate，Lac)、pH值、氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2);于基线、复苏后1、3、6、24h时，采集静脉血评估肌钙蛋白Ⅰ(TroponinⅠ，TNⅠ)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme，CK-MB)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase，NSE)、S100B、肌酐(Creatinine，Cr)、尿素氮(Blood urea nitrogen，BUN)、肠脂肪酸结合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein，IFABP)、二胺氧化酶(Diamine oxidase，DAO)、血清钠离子、钾离子、凝血酶原时间(Prothrombin time，PT)、及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-6(Interleukins-6，IL-6)水平。复苏后24h动物安乐死，获取心、脑、肺、肾、肠的组织标本，用原位末端标记法(TUENL法)检测细胞凋亡程度，以及免疫组织化学染色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。 结果: 1.三组动物复苏前一般情况及复苏结果比较:复苏前三组动物的体重、HR、EtCO2、MAP、Lac水平均无明显差异(p＞0.05)。TCA组9头猪中有8头猪复苏成功，而Sham组和SFI组所有猪均复苏成功。 2.三组动物血流动力学指标比较:与Sham组相比，TCA组的HR在复苏后1、3与6h，SFI组的HR在复苏后1、3h增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的HR在复苏后3、6h明显降低，差异有统计学意义(均p＜0.05)。与Sham组相比，TCA组的MAP值在复苏后1h明显降低(p＜0.05)，SFI组的MAP值在复苏后各时点无明显差异(均p＞0.05);与TCA组相比，SFI组的MAP值在复苏后1、3与6h值虽有所提升，但差异无统计学意义(均p＞0.05)。 3.三组动物心肌损伤指标比较:与Sham组相比，TCA组的TNI水平在复苏后1、3、6与24h，SFI组复苏后3、6h均明显增高，差异有统计学意义(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的TNI水平在复苏后3、6与24h明显降低，差异有统计学意义(均p＜0.05)。与Sham组相比，TCA组的CK-MB水平在复苏后1、3h，SFI组的CK-MB水平在复苏后1、3与6h均明显高于Sham组，差异有统计学意义(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的CK-MB水平在复苏后1、3与6h有所降低，但差异无统计学意义(p＞0.05)。 4.三组动物脑损伤指标比较:与Sham组相比，TCA组的NSE和S100B水平在复苏后1、3、6与24h，SFI组在复苏后3、6h均明显增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组NSE和S100B水平在复苏后3、6与24h明显降低，差异有统计学意义(均p＜0.05)。 5.三组动物呼吸功能指标比较:三组动物的PaO2水平在基线及复苏后各时点的PaO2水平差异无统计学意义(均p＞0.05)。三组动物的PaCO2水平在基线时差异无统计学意义(p＞0.05)，具有可比性，TCA组和SFI组在复苏后各时点PaCO2水平较Sham组有所降低，但差异均无统计学意义(均p＞0.05)。 6.三组动物肾损伤指标比较:与Sham组相比，TCA组的Cr水平复苏后24h明显增高(p＜0.05)，SFI组的Cr水平在复苏后虽较Sham组有所增高，但差异无统计学意义(均p＞0.05);与TCA组相比，SFI组的Cr水平在复苏后差异也无统计学意义(均p＞0.05)。与Sham组相比，TCA组的BUN水平在复苏后1、3、6与24h，SFI组在复苏后3、6h明显增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的BUN水平在复苏后3、6h较TCA组已明显降低，差异有统计学意义(均p＜0.05)。 7.三组动物肠损伤指标比较:与Sham组相比，TCA组的IFABP和DAO水平在复苏后3、6h明显增高(均p＜0.05)，SFI组的IFABP水平在复苏后3h较Sham组升高(p＜0.05)，DAO水平虽在复苏后6h较Sham组升高(p＜0.05)。与TCA组相比，SFI组的IFABP和DAO水平在复苏后3、6与24h明显降低，差异有统计学意义(均p＜0.05)。 8.三组动物血清电解质及凝血功能指标比较:三组动物在复苏后各时点的血清钠离子、钾离子水平及凝血酶原时间差异均无统计学意义(p＞0.05);三组动物血清钠离子、钾离子水平及凝血酶原时间组内及组间差异均无统计学意(p＞0.05)。 9.三组动物动脉血乳酸及PH值比较:与Sham组相比，TCA组的乳酸水平在复苏后1、3h，SFI组在复苏后3、6h明显增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的乳酸水平在复苏后1、3h较TCA组明显降低，差异有计学意义(均p＜0.05)。与Sham组相比，TCA组及SFI组的PH值在复苏后1、3h均有所降低，但差异无统计学意义(p＞0.05);与TCA组相比，SFI组的PH值在复苏后1、3h有所升高，但差异也无统计学意义(p＞0.05)。 10.三组动物血清炎症因子水平比较:与Sham组相比，TCA组和SFI组的TNF-α水平和在复苏后1、3、6与24h均明显增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的TNF-α水平在复苏后3、6与24h明显降低(均p＜0.05)。与Sham组相比，TCA组的IL-6水平在复苏后1、3、6与24h，SFI组在复苏后3、6与24h均明显增高(均p＜0.05);与TCA组相比，SFI组的IL-6水平在复苏后3、6与24h明显降低(均p＜0.05)。 11.三组动物主要脏器细胞凋亡程度比较:与Sham组相比，TCA组与SFI组在复苏24h时均存在组织细胞凋亡，表现为心、脑、肺、肾、肠组织细胞凋亡指数增高及凋亡标志蛋白Caspase-3的表达增加(均p＜0.05);SFI组心、脑、肺、肾、肠组织凋亡指数较TCA组降低，但差异均无统计学意义(p＞0.05)，SFI组的各组织Caspase-3表达较TCA组减少，其中心、肺组织Caspase-3表达差异有统计学意义(均p＜0.05)。 结论: 猪创伤性心脏骤停复苏后出现多脏器功能损伤，早期应用参附注射液能够减轻脏器损伤程度，其机制可能与抑制全身炎症反应、减轻细胞凋亡有关。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词表

1 引言

2主要设备仪器和试剂

2．1主要设备仪器

2．2药品及主要耗材

3实验对象及主要方法

3．1 实验动物

3．2研究设计及分组

3．3实验动物准备及手术操作

3．4创伤性心脏骤停复苏猪模型建立

3．5复苏后观察及评价指标

3．6统计学方法

4 结果

4．1 复苏前一般情况及复苏结果及比较

4．2 三组动物血流动力学指标的比较

4．3三组动物心肌损伤指标的比较

4．4三组动物脑损伤指标的比较

4．5三组动物呼吸功能指标的比较

4．6三组动物肾损伤指标的比较

4．7三组动物肠损伤指标的比较

4．8 三组动物血清电解质、凝血功能指标的比较

4．9三组动物动脉血乳酸、PH值的比较

4．10三组动物血清炎症介质的比较

4．11 复苏后24 h时三组动物主要脏器细胞凋亡程度比较

5 讨论

6 结论

参考文献

综述 参附注射液在心脏骤停后综合症中应用的研究进展

作者简历及在学期间所取得的科研成果