声明
致谢
摘要
缩略语表
1.1.1圆锥铁线莲简介
1.1.2植物响应胁迫的研究进展
1.1.3香豆素生物合成的研究进展
1.2多酚氧化酶的研究进展
1.2.1多酚氧化酶的简介
1.2.2植物中多酚氧化酶的研究现状
1.3异戊烯基转移酶的研究进展
1.3.1异戊烯基化反应的简介
1.3.2异戊烯基转移酶的简介
1.3.3异戊烯基转移酶的研究现状
1.4本文的研究目的、内容与意义
1.4.1圆锥铁线莲中多酚氧化酶功能的探究
1.4.2圆锥铁线莲中香豆素异戊烯基转移酶的克隆和表达
2.1前言
2.2材料
2.2.1植物来源
2.2.2主要试剂
2.2.3主要仪器
2.3方法
2.3.1样品处理
2.3.2 RNA提取和CtPPO的克隆
2.3.3载体构建
2.3.3基因沉默
2.3.4蛋白组学检测
2.3.5蛋白质组学分析
2.3.6生理指标测定
2.3.7数据分析
2.4结果
2.4.1通过vigs技术对圆锥铁线莲中PPO的沉默
2.4.2 PPO基因沉默圆锥铁线莲植株(VIGS-CtPPO)中蛋白的变化
2.4.3高剂量UV-B照射联合暗培养处理对VIGS-CtPPO和VIGS-vector的圆锥铁线莲植株叶片中蛋白的影响
2.4.4对VIGS-CtPPO和VIGS-vector植株在高剂量UV-B照射联合暗培养处理前后差异表达蛋白的综合分析
2.4.5对VIGS-CtPPO和VIGS-vector植株在HUV-B+D处理前后差异表达蛋白的MapMan分析
2.4.6圆锥铁线莲叶片中与糖酵解相关蛋白的表达谱分析
2.4.7 VIGS-CtPPO对圆锥铁线莲叶片光合特性的影响
2.4.8 VIGS-CtPPO对圆锥铁线莲叶片ATP合酶的影响
2.5讨论
2.5.1对CtPPO的沉默促进了圆锥铁线莲的光反应过程
2.5.2对CtPPO的沉默激活了圆锥铁线莲的卡尔文循环
2.5.3对CtPPO的沉默增强了圆锥铁线莲的糖酵解过程
2.5.4人工干预PPO活性在农业生产中具有潜在的应用价值
2.6小结
第3章圆锥铁线莲中香豆素异戊烯基转移酶的克隆和表达
3.1前言
3.2材料
3.2.1样品
3.2.2质粒与菌株
3.2.3主要试剂
3.2.4主要仪器
3.3方法
3.3.1溶液及培养基
3.3.2目的序列的获取
3.3.3 CtPT基因生物信息学分析
3.3.4 CtPT表达特异性分析
3.3.5 CtPT1表达载体的构建
3.3.6 CtPT1在酵母中的表达
3.3.7 CtPT1的亚细胞定位
3.4结果
3.4.1对圆锥铁线莲中异戊烯基转移酶的发掘
3.4.2对圆锥铁线莲中香豆素异戊烯基转移酶的鉴定
3.4.3圆锥铁线莲中香豆素异戊烯基转移酶的异源表达
3.4.4圆锥铁线莲中香豆素异戊烯基转移酶的亚细胞定位
3.4.5 CtPT1在圆锥铁线莲中的表达特异性分析
3.5讨论
3.5.3 CtPT1可能与圆锥铁线莲对HUV-B+D的抗逆性有关
3.6小结
4.1总结
4.2展望
参考文献
附表
个人简介