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摘要
技术路线
缩略词
第一章血清4型禽腺病毒分子生物学研究进展
1．1病原学
1．1．1腺病毒的分类
1．1．2禽腺病毒的基因组结构
1．1．3禽腺病毒的理化特性
1．2编码蛋白及其功能
1．2．1结构蛋白
1．2．2非结构蛋白
1．3病毒的复制
1．4流行病学与致病特征
1．5临床症状与病理剖检
1．5．1临床症状
1．5．2病理剖检变化
1．6禽腺病毒的诊断与防治
第二章禽腺病毒4型浙江株的分离鉴定及全基因组测序分析
2．1材料
2．1．1病料、鸡胚、细胞
2．1．2主要试剂材料
2．1．3主要仪器设备
2．2方法
2．2．1病料的处理
2．2．2引物设计
2．2．3病毒基因组抽提
2．2．4 PCR检测
2．2．5病毒的分离培养
2．2．6血凝(HA)实验
2．2．7间接免疫荧光实验(IFA)检测FAdV-4感染的细胞
2．2．8鸡胚致病性实验
2．2．10病毒全基因组扩增
2．2．11序列的比对与分析
2．3结果
2．3．2 FAdV-4 ZJ2015血凝性鉴定
2．3．3 FAdV-4 ZJ2015对细胞的感染性
2．3．4 FAdV-4 ZJ2015病毒滴度TCID50定
2．3．6 FAdV-4 ZJ2015全基因组扩增
2．3．7 FAdV-4序列同源性及全基因组遗传进化分析
2．3．8 FAdV-4 ZJ2015全基因组编码蛋白及突变分析
2．3．9 FAdV-4 ZJ2015毒株Hexon和Fiber Ⅱ蛋白氨基酸进化分析
2．4讨论
第三章Hexon、Fiber Ⅱ蛋白单克隆抗体的制备
3．1材料
3．1．1毒株、菌株及载体
3．1．2鸡胚、细胞和实验动物
3．1．3主要试剂耗材
3．1．4主要仪器设备
3．2方法
3．2．1 Hexon、Fiber Ⅱ原核表达戴体与真核表达戴体的构楚
3．2．2重组蛋白的诱导表达、鉴定及纯化
3．2．3蛋白免疫BALB/c小鼠及多抗血清的反应性鉴定
3．2．4细胞融合
3．2．5阳性细胞株的筛选与亚克隆
3．2．6单抗胰水的制备
3．2．7单克隆抗体特性鉴定
3．2．8单克隆抗体亚类鉴定
3．2．10 Hexon、Fiber Ⅱ蛋白动态表达分析
3．3结果
3．3．1截短目的基因的扩增
3．3．2原核和真核表达载体的鉴定
3．3．3 His-Hexon、His-Fiber Ⅱ重组蛋白的诱导表达及纯化
3．3．4多抗血清反应性检测
3．3．5阳性单克隆细胞株的获得
3．3．6单克隆抗体反应性鉴定
3．3．7单克隆抗体亚类鉴定
3．3．8 Hexon、Fiber Ⅱ蛋白单克隆抗体抗原表位初步分析
3．3．9 Hexon、Fiber Ⅱ蛋白动态表达分析
3．4讨论
全文总结
参考文献
附录
作者简历
攻读硕士期间科研成果
