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桃果实结合态芳樟醇形成相关的UGT基因家族成员鉴别与调控研究

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摘要

缩略语表

1绪论

1.1结合态芳香物质的结构组

1.1.1糖苷配基

1.1.2糖配体

1.2结合态芳香物质的功能

1.2.1结合态芳香物质与果实风味品质

1.2.2结合态芳香物质与抗性

1.2.3结合态芳香物质与脱毒

1.3.1 UGT基因家族成员鉴别

1.3.2果实结合态芳香物质及合成相关的UGT鉴定

1.4桃果实芳樟醇等结合态芳香物质的研究进展

1.5研究目标与内容

2桃的UGT基因家族鉴别与表达分析

2.1材料与方法

2.1.1桃果实发育阶段及不同组织材料

2.1.2 UV-B处理及取样

2.1.3结合态芳香物质提取

2.1.5桃UGT基因家族成员的鉴定

2.1.6序列比对和进化树分析

2.1.7内含子定位和结构组成

2.1.8利用RNA-seq进行基因表达分析

2.1.9数据分析

2.2结果分析

2.2.1桃UGT基因家族成员的聚类分析

2.2.2桃UGT基因的染色体分布

2.2.3桃UGT基因的内含子和外显子结构

2.2.4桃UGT基因在果实发育阶段和不同组织中的基因表达模式

2.2.5 UV-B照射桃果实影响UGT基因表达

2.3讨论

3桃果实结合态芳香物质的检测分析

3.1材料与方法

3.1.1梳果实发育阶段及不同组织材料

3.1.3 UV-B处理及取样

3.1.4结合态芳香物质提取

3.2.1梳果实发育阶段结合态芳香物质检测分析

3.2.2桃不同组织的结合态芳香物质检测分析

3.2.3外源乙烯处理对桃果实结合态芳香物质的影响

3.2.4 UV-B处理对桃果实结合态芳香物质的影响

3.3讨论

4桃PpUGT85A2参与结合态芳棒醇形成

4.1材料与方法

4.1.1祧果实发育阶段及不同组织材料

4.1.2桃果实不同品种材料

4.1.4 UV-B处理及取样

4.1.5结合态芳香物质提取

4.1.10进化树构建

4.1.11原核表达载体构建

4.1.12 UGT原桉表达和蛋白纯化

4.1.13 UGT酶活性测定

4.1.14酶动力学常数测定

4.1.15利用qPCR进行基因表达分析

4.1.16桃叶圆片试验

4.1.17过表达载体构建

4.1.18桃果实同源瞬时过表达

4.1.19烟草转基因

4.1.20拟南芥转基因

4.1.21亚细胞定位分析

4.1.22数据统计分析

4.2结果分析

4.2.1PpUGT85A2表达与祧果实结合态芳樟醇含量的相关性分析

4.2.2桃不同组织和品种中PpUGT85A2表达与结合态芳棒醇含量相关

4.2.3 PpUGT85A2重组蛋白催化结合态芳樟醇的体外合成

4.2.4PpUGT85A2在桃组织中的瞬时表达

4.2.5PpUGT85A2过表达增加植物中结合态芳樟醇积累

4.2.6 PpUGT85A2的亚细胞定位

4.3讨论

5结构基因PpUGT85A2的转录调控分析

5.1材料与方法

5.1.1桃果实发育阶段材料

5.1.2利用RNA-seq进行基因表达分析

5.1.4烟草双荧光素酶体系

5.1.5转录因子结合位点预测

5.1.6数据统计分析

5.2结果分析

5.2.2转录因子与PpUGT85A2的相关性分析

5.2.3转录因子对于PpUGT85A2启动子调控效应分析

5.2.4采后处理对PpNAC8基因表达的影响

5.3讨论

6小结与展望

参考文献

作者学习经历及在学期间所取得的科研成果

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