阿托伐他汀钙对扩张型心肌病心力衰竭患者促炎性细胞因子表达及NF-кB/p65活化的影响

摘要

目的： 探讨扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）心力衰竭（heart failure，HF）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells ，PBMCs）促炎性细胞因子（cytokines ，CK）白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌和核因子-кB/p65（nuclear factor-кB/p65 ，NF-кB/p65）的活化，并比较二者的相关性；不同浓度的阿托伐他汀钙（atorvastatin calcium，Ale）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的DCM HF患者PBMCs CK表达和NF-кB/p65活化的影响及Ale抑制CK分泌的可能机制，为Ale应用于DCM HF的治疗提供理论依据。 方法： DCM组25例，来自泸州医学院附属医院心血管内科2005年7月至2005年12月的住院DCM HF患者，心功能分级（NYHA分级法）Ⅱ～Ⅳ级，其中，Ⅱ级15例，Ⅲ级6例，Ⅳ级4例，左心室射血分数平均< 40％。对照组18例，来自同期泸州医学院附属医院门诊健康体检者和同学们。抽取受试者空腹静脉血5ml。应用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基悬浮细胞，调整细胞数为2×107个/ml，分别吸取1ml细胞悬液于24孔培养板的4个孔内，然后按实验分组分别加入：A:1640培养基1ml；B:10-5 mol/l Ale培养基1ml；C:10-6mol/lAle培养基1ml；D:10-7 mol/l Ale培养基1ml。30分钟后在4个孔内各加入LPS（浓度为10μg/ ml）0.5 ml。5％CO2饱和湿度的孵箱370C孵育24h。离心后提取上清液并用放射免疫法测IL-1β、IL-6、TNF-α水平；细胞悬液涂片并固定后用生物素-链霉亲和素免疫组织化学染色法测NF-кB/ p65，在显微镜下计算其阳性细胞率。对指标分别进行t检验、单因素方差分析和Pearson相关分析。 结果： 1. DCM组IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-кB/p65的水平均显著高于对照组（P<0.01），分别为IL-1β（8.24±0.70ng/L VS 3.89±1.25 ng/L）、IL-6（2372.43±277.12 pg/L VS 382.05±142.22 pg/L）、TNF-α（3.03±0.22 ng/L VS 1.29±0.25 ng/L）和NF-кB/p65（32.63％±5.80％ VS 10.58％ ±1.91％）。 2.随着Ale浓度的增加，DCM组和对照组 IL-1β、IL-6、TNF-α水平和NF-κB/p65阳性细胞率呈进行性下降(p<0.05)；10-7 mol/lAle组、10-6mol/l Ale组、10-5 mol/lAle组 IL-1β、IL-6、 TNF-α水平和NF-κB/p65阳性细胞率均显著低于0 mol/lAle组（p<0.05）；10-5 mol/l组IL-1β、TNF-α水平和NF-κB/p65阳性细胞率均显著低于10-6mol/l组、10-7 mol/l组（p<0.05）；10-6mol/l组IL-6水平显著低于10-7 mol/l组（p<0.05）；但10-6mol/l组IL-1β、TNF-α水平、NF-κB/p65阳性细胞率和10-7 mol/l组相比，10-5 mol/l组IL-6水平和10-6mol/l组相比则无显著性差异（p >0.05）.且DCM组IL-1β、IL-6 、TNF-α水平和NF-кB/p65阳性细胞率下降程度显著高于对照组（P<0.05）。 3.对照组和DCM组NF-кB/p65阳性细胞率与IL-1β、IL-6、TNF-α水平均呈显著正相关，对照组（r值分别为0.647、0.575、0.536，p值分别小于0.01、0.05、0.05）；DCM组（r值分别为0.527、0.657、0.515，p值分别小于0.05、0.01、0.05）。 结论： 1.DCM CHF患者外周血CK分泌和NF-кB/p65活化明显增加。 2. Ale能有效降低PBMCs在LPS刺激下CK水平及NF-κB的活化，其作用具有剂量依赖性。这可能是Ale降低DCM CHF死亡率和改善预后的机制之一。 3. Ale能降低DCM CHF患者CK水平，其可能机制是通过抑制NF-κB这一途径来实现的。