转中国对虾抗菌肽基因np3，np5的水稻抗性研究

摘要

抗菌肽能通过破坏膜或者代谢途径，起到防御细菌，真菌和病毒毒害的作用。本研究将中国对虾抗菌肽基因np3和np5分别导入粳稻品种爱知旭体内，研究是否增强了水稻白叶枯病的抗性。农杆菌介导转化获得19株np3转基因阳性T0代植株，9株np5转基因阳性T0代植株。T1代各株系农艺性状考查结果显示中国对虾抗菌肽np3和np5基因的表达对爱知旭无毒性作用，白叶枯病菌小种CR4接种结果表明np3和np5转基因植株的白叶枯病抗性得到显著增强。主要结果如下：
　　1.植物表达载体nph3和nph5分别转化爱知旭，获得150株np3 T0转基因苗和145株 np5 T0转基因苗。用引物P3和P5分别对50株np3转基因苗和20株np5转基因苗进行PCR检测，结果显示，18株np3转基因植株检测到420bp的目的条带，转基因苗阳性率为36％，9株np5转基因苗检测到310bp的目的条带，转基因阳性率为45%。
　　2.对T1代转基因株系的单株进行PCR检测，统计分析目的基因在T1代的分离情况，共筛选到6个转基因株系的阳性株和阴性株分离比符合3：1，其中3个为np3转基因株系，3个为np5转基因株系。T1代植株RNA表达分析结果说明了两个基因在RNA水平上得到表达。
　　3.在试验基地调查了各转基因株系的农艺性状，并和对照株系的农艺性状作比较，说明了中国对虾抗菌肽基因np3和np5在水稻体内的表达没有对水稻造成不良影响。
　　4.进行抗病试验，接种的转基因植株和对照植株表现出不同程度的抗病和感病情况，其中转基因阴性对照植株和转基因阳性植株的抗病和感病的分离差异明显，转基因阴性对照植株的病斑长度与叶长的比值变化范围很广，而转基因阳性植株的病斑与叶长的比值较稳定，介于1-20%之间。

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英文缩略表

引言

第一章 文献综述

1.1 转基因植物

1.2 转白叶枯病基因水稻的抗性研究

1.3 转抗菌肽基因水稻的研究

1.4研究目的和技术路线

第二章 转中国对虾抗菌肽基因np3，np5的水稻抗性研究

2.1引言

2.2材料和方法

2.3结果与分析

2.4讨论

第三章 结论及展望

3.1结论

3.2展望

参考文献

附录

致谢