HLA-DQA1基因多态性与儿童支气管哮喘的相关性及血清IL-4、IFN-γ水平关系的研究

摘要

目的：探讨人类白细胞抗原HLA-DQA1基因多态性与儿童支气管哮喘的关联性,寻找与哮喘发作有关的易感基因和(或)抑制基因；观察哮喘组的血清 IL-4、IFN-γ 水平；比较含有及不含有哮喘相关基因的哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ 的浓度,分析是否有差异,为进一步研究哮喘发病机制、预防哮喘发作及寻找基因水平上治疗哮喘的方法提供相应的理论依据。方法：1.标本采集：哮喘组：选取急性发作期哮喘患儿共45例为哮喘组。对照组：收集与哮喘组年龄相仿的正常健康儿童60例为对照组。2.检测方法及指标：采用聚合酶链反应—序列特异性引物(PCR-SSP)方法测定哮喘组、对照组的HLA-DQAl等位基因,并计算两组中各等位基因的基因频率(直接计算法：基因频率=阳性基因数/样本数×2),两组间进行比较；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定哮喘组、对照组中血清IL-4、IFN-γ水平浓度,并对结果进行统计学处理。3.统计学处理：运用SPPS-17.0软件系统分析,哮喘组与对照组各等位基因的基因频率比较采用 χ2检验,P<0.05 认为有统计学意义,并计算优势比(OR)及95%置信区间。测定的血清IL-4、IFN-γ水平浓度,经SPPS-17.0软件系统分析后结果用均数±标准差( ±s)表示,两两比较采用LSD-t检验,相关分析采用Pearson相关性分析,P<0.05认为有统计学意义。结果：(1)哮喘组与对照组之间HLA-DQA1等位基因频率比较：HLA-DQA1*0301 在哮喘组的基因频率(20.00%)明显高于对照组(8.33%),χ2=7.159,P=0.007,有统计学意义,OR为3.333(95%置信区间为1.35-8.229)。HLA-DQA1*0104在哮喘组的基因频率(27.77%)明显低于对照组(38.33%),χ2值为5.234,P=0.022,差异有统计学意义,OR为0.380, 95%置信区间为(0.164-0.880)。(2)哮喘组和对照组外周血IL-4、INF-γ水平比较：哮喘组中血清 IL-4 水平(116.45 ±20.45)明显高于对照组(90.34 ±13.43),差异有统计学意义(P<0.05)；哮喘组血清IFN-γ水平(65.34±12.34)明显低于对照组(84.23 ±13.42),差异有统计学意义(P<0.05)；(3)哮喘组IFN-γ与IL-4的相关性分析：哮喘急性发作期血清IFN-γ与IL-4水平呈负相关(r=-0.356,P<0.05)。(4)HLA-DQA1*0301阳性哮喘患者(18例)与HLA-DQA1*0301阴性哮喘患者(27例)IFN-γ(水平分别为67.12 ±13.24、69.13 ±12.16)、IL-4(水平分别为114.23 ±23.45、113.21 ±20.34)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：1.HLA-DQA1*0301基因可能为儿童支气管哮喘的易感基因；HLA-DQA1*0104 基因可能为儿童哮喘的免疫抑制基因。2.哮喘组中IFN-γ较对照组明显下降,IL-4则明显升高,哮喘组中两者呈负相关,表明Th1/Th2免疫失衡仍可能是哮喘发作的重要因素。3.存在与不存在易感基因的哮喘患者血清 IFN-γ、IL-4 水平比较无显著差异,表明HLA-DQA1*0301可能仅某种特应性变应原所致的哮喘有关,亦表明哮喘发作与否不是由某个等位基因决定,其发作可能为多基因共同作用的结果。

目录

封面

目录

中文摘要

英文摘要

前言

材料及方法

1.研究对象

2. 实验方法

结果

讨论

3.1 HLA-DQ基因多态性与哮喘的关系

3.2 IL-4在哮喘发病的作用：

3.3 IFN-γ在哮喘中的作用

3.4 IFN-γ/IL-4细胞失衡在哮喘中的作用

3.5 HLA-DQ与哮喘血清中IL-4、IFN-γ水平的关系

3.6 不足及展望：

结论

参考文献

英汉缩略语名词对照

致谢

HLA-Ⅱ类基因多态性与支气管哮喘的相关性研究进展

声明