少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤关节液IL-1β及软骨修复组织Ⅰ、Ⅱ型胶原影响的实验研究

摘要

目的:膝关节软骨损伤在临床上较常见，但其自我修复能力极其有限，缺乏确切有效的治疗手段，容易发展为创伤性关节炎及引起关节功能障碍，所以一直是医学领域的难点及研究热点。因此，本课题应用少阳生骨方对大鼠在体软骨损伤进行干预，观察其对关节软骨损伤的修复效果，证实其对软骨损伤的修复作用，探讨该方治疗软骨损伤的部分机理，为中医药在治疗软骨损伤领域提供实验依据和开辟新的途径。为下一步继续研究少阳生骨方修复软骨损伤的机理和从分子生物学及细胞学水平进一步阐明该方的作用打下基础，为临床推广提供有力证据。
　　 方法:
　　 1、膝关节软骨损伤动物造模及药物干预:选用在相同条件下喂养的6～8周清洁级SD大鼠(泸州医学院动物实验中心提供)27只，雌雄不限，体重250±20g。称重后于无菌条件下在股骨滑车上正中用一直径为2mm空心针钻孔，形成全厚软骨缺损，成为关节软骨损伤动物模型，按照组内均衡一致原则随机编为3组，即少阳生骨方组实验组（S组）、盐酸氨基葡萄糖胶囊组对照组（A组）和空白对照组(K组)，每组9只。于造模完成后的第二天，开始灌胃药物，S组少阳生骨方灌胃，A组盐酸氨基葡萄糖胶囊灌胃，K组生理盐水灌胃。
　　 2、对比观察少阳生骨方及盐酸氨基葡萄糖胶囊对大鼠关节软骨损伤后不同时期（4周、8周、12周）关节液中IL-1β水平的影响。
　　 3、对比观察少阳生骨方及盐酸氨基葡萄糖胶囊对大鼠关节软骨损伤后不同时期（4周、8周、12周）软骨修复组织形态和软骨基质中Ⅰ、Ⅱ型胶原表达的影响。
　　 结果:(1)三组关节液中IL-1β水平检测，S组和A比较:第4、8、12周A组高于S组(P＜0.05);第4、8、12周K组高于S组(P＜0.05);第4、8、12周K组高于A组(P＜0.05)。治疗前后自身比较:S组第8周、第12周均低于第4周（P＜0.05）;A组第8周、第12周均低于第4周(P＜0.05);K组第4周＞第8周＞第12周(P＜0.05)。(2)大体观察和组织学观察均显示S、A组软骨缺损修复组织的数量及质量均优于K组，且S组的修复效果强于A组。(3)少阳生骨方和盐酸氨基葡萄糖胶囊均可提高软骨损伤后修复组织中Ⅱ型胶原的表达(P＜0.05)，但两组比较无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论:(1)通过和解少阳的方法可降低关节液中软骨细胞损伤的炎性介质IL-1β水平，为临床治疗软骨损伤提供理论依据。(2)该实验采用Mankin评分表，对关节软骨损伤修复组织各期进行评分，这对以后软骨损伤各个不同时期的研究提供了实验理论基础。(3)少阳生骨方和盐酸氨基葡萄糖胶囊均可提高软骨损伤后修复组织中Ⅱ型胶原的表达，以促进关节软骨的再生。(4)少阳生骨方在修复关节软骨缺损方面的作用优于盐酸氨基葡萄糖胶囊，提示少阳生骨方促进关节软骨损伤的修复疗效满意，同时进一步证实“少阳主骨”理论，值得进一步研究并推广应用。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验步骤

结果

1 模型建立一般情况

2 关节液中IL-1B水平

3 软骨修复组织标本大体观察结果

4 光镜下HE染色结果

6 Mankin评分结果

8 免疫组织化学结果观察

讨论

1 膝关节软骨损伤研究及意义

2 膝关节软骨损伤大鼠模型的建立

3 关节软骨损伤同炎性因子IL-1β关系

4 关节软骨损伤同胶原的关系

5 少阳主骨理论基础及少阳生骨方方解

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

膝关节软骨损伤的诊治进展 综述

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