不同剂量1,25(OH)2D3协同甲强龙哮喘小鼠气道炎症的影响及机制

摘要

目的:近来越来越多的研究发现，维生素D可以通过增强糖皮质激素抗炎效应或逆转激素抵抗作用来治疗哮喘。一旦涉及到补充维生素D，其补充剂量便是最关心的问题。目前补充维生素D的剂量以及其不同浓度产生的不同效应方面尚无统一标准，因此，本试验探寻能协同甲强龙最大限度发挥抗炎作用的维生素D补充剂量，为维生素D应用于治疗和预防哮喘，增强糖皮质激素的敏感性，降低糖皮质激素的用量提供依据。
　　方法:将4-5周BALB/C雌性小鼠40只随机分为5组:空白对照组(A)、哮喘组(B)、甲强龙组(C)、低剂量1，25(OH)2D3联合甲强龙组(D)、高剂量1，25(OH)2D3联合甲强龙组(E)，每组8只。B、C、D、E、组分别用卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)溶液腹腔注射致敏与OVA雾化吸入激发，C、D、E组激发前1h分别予以5mg/kg的标准腹腔注射甲强龙干预，低剂量1，25(OH)2D3联合甲强龙组(D)激发前1h以5ug/kg的标准腹腔注射1，25(OH)2D3(等同于我国维生素D每日推荐摄入量(RNI)400IU)干预，高剂量1，25(OH)2D3联合甲强龙组(E)激发前1h以10ug/kg的标准腹腔注射1，25(OH)2D3(等同于我国维生素D每日推荐摄入量(RNI)的两倍）干预。A组予以等剂量0.9％生理盐水腹腔注射和雾化吸入。最后1次激发后24 h，测定各小鼠气道反应性后处死小鼠，行肺泡灌洗液细胞计数及肺组织苏木精一伊红(H—E)染色观察各组小鼠气道炎症情况。用免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠肺组织匀浆液MKP-1(Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1，丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1)的表达，酶联免疫吸附测定法检测各组小鼠血清IL-10、趋化因子FKN(fractalkine)的含量。
　　结果:1:经1，25(OH)2D3干预后的D组、E组分别与哮喘组、甲强龙组比较，增强呼气间歇值(Penh)明显降低（P＜0.05）;小鼠血清IL-10的含量显著升高（P＜0.05）;趋化因子FKN(fractalkine)的含量显著降低（P＜0.05）;肺组织匀浆液MKP-1的表达水平明显上调（P＜0.05）;肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性粒细胞数(Eosinophils，EOS)比例降低明显（P＜0.05);肺组织切片显示支气管嗜酸性粒细胞浸润以及粘膜充血水肿、炎症较轻，组织结构形态学上未见明显肺泡结构破坏、肺泡增厚及肺泡间质纤维化。模型组肺组织炎症最重，支气管粘膜见大量嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润，肺泡腔内有大量坏死渗出物，纤毛倒伏脱落，上皮细胞坏死，甲强龙组病理变化介于两者之间。D组与E组气道增强呼气间歇值(Penh)、血清IL-10、FKN(fractalkine)的含量及肺组织匀浆液MKP-1的表达水平及肺泡灌洗液细胞数之间差异均无统计学意义（P＞0.05），肺组织切片炎症均较轻微，两组之间无明显差异。
　　结论:高剂量1，25(OH)2D3与低剂量1，25(OH)2D3均能通过上调MKP-1、IL-10的表达，降低FKN的含量来协同增强甲强龙减轻哮喘小鼠气道炎症的作用，高剂量1，25(OH)2D3协同增强甲强龙的抗炎作用与低剂量1，25(OH)2D3协同增强甲强龙的抗炎作用之间无明显差异。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

3．统计学分析

结果

1 1，25(OH)2D3能协同增强甲强龙抑制哮喘小鼠气道高反应性，高剂量与低剂量1，25(OH)2D3对甲强龙的协同作用无明显差异

2 1，25(OH)2D3能协同增强甲强龙减轻哮喘小鼠支气管BALF炎症细胞浸润，高剂量与低剂量1，25(OH)2D3对甲强龙的协同作用无明显差异

3 肺组织HE染色结果

4 肺组织匀浆MKP-1免疫印迹法检测结果

5 ELISA方法检测小鼠血清IL-10、FKN(fractalkine)的表达结果

附 图表

讨论

结论

参考文献

英汉略缩词对照表

致谢

维生素D与糖皮质激素在治疗哮喘中的协同作用 综述

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