心安颗粒对局灶性脑缺血大鼠心肌细胞动作电位的影响研究

摘要

目的:通过观察心安颗粒对局灶性脑缺血大鼠心肌细胞动作电位的影响，初步探讨“脑心综合征”可能的发生机制，并初步阐释心安颗粒治疗脑心综合征的可能机制，为认识、预防和治疗脑心综合征提供可靠的实验依据。
　　方法:将130只健康雄性成年SD大鼠，体重（278g±23）g，随机分成六组，每组20只（另10只备用）:模型组、假手术组、心安颗粒低剂量组（简称“低剂量组”）、心安颗粒中剂量组（简称“中剂量组”）、心安颗粒高剂量组（简称“高剂量组”）、稳心颗粒对照组（简称“对照组”）。以Zea longa法为标准制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，假手术组只行正中切口，但不插入线栓，各用药组均在动物苏醒后灌胃，假手术组和模型组给予等体积(3ml)生理盐水灌胃，对照组给药剂量20ml/kg/d，心安颗粒高、中、低剂量组给药剂量分别为5.0g/(kg·d)、2.5g/(kg·d)、1.25g/(kg·d)，连续7d:①记录手术前及术后6h、12h、24h、48h、72h、7d、15d各个时间点各组大鼠心电图的变化;②检验手术前及术后1d、2d、3d、5d、7d各个时间点心肌同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、电解质(Na+、K+、CL-)的变化;③心肌细胞动作电位的记录:记录造模成功后大鼠24h、48h、72h、7d、15d心肌细胞动作电位的变化;④断头取脑，脑组织NPY蛋白含量的放射免疫测定;⑤统计学处理:统计结果应用SPSS13.O统计软件进行统计学处理，统计学数据用均数±标准差(x-±s）表示，两样本均数比较采用t检验，免疫荧光结果应用ImageJ1.44e分析软件进行分析;P＜0.05为具有统计学意义。
　　结果:(1)各组大鼠心电图的改变。术前:各组大鼠心电图均无明显异常。术后:假手术组大鼠在各时间点心电图均未出现明显异常改变;在各时间点出现心电图异常的大鼠情况:①假手术组:12 h有6只(60％)，24h有9只(90％)，48h有8只(80％)、72h有5只(50％)，7d有2只(20％)，15d有1只(10％);②低剂量组:12h有4只(40％)，24h有8只(80％)，48h有7只(70％)，72h有3只(70％)，7d有2只(20％)，15d有1只(10％);③中剂量组12h有5只(50％)，24h有6只(60％)，48h有4只(40％)，72h有2只(20％)，7d有1只(100％)，15d有0只;④高剂量组:12h有4只(40％)，24h有5只(50％)，48h有2只(20％)，72h有1只(10％)，7d有0只，15d有0只;⑥对照组:12h有4只(40％)，24h有6只(60％)，48h有3只(30％)，72h有2只(20％)，7d有1只(10％)，15d有1只(10％)。心电图改变具有多样性，如窦性心动过速/缓、房性早搏、室性早搏、ST段改变、T波高尖、倒置或低平、Q-T间期延长、束支传导阻滞等，其中以窦性心律不齐、ST段、T波改变多见，同一大鼠可同时出现多种异常心电图。与假手术组比较，模型组、各组给药大鼠心电图改变所占比例明显升高，差异有显著性(P＜0.01，或P＜0.05)。与模型组比较，高剂量组、中剂量组、低剂量组及对照组出现异常心电图所占比例明显降低，差异有显著性(P＜0.01，或P＜0.05)。与低剂量组比较，高剂量组、中剂量组及对照组心电图改变所占比例均降低，差异有统计学意义(P＜0.05);两两比较中剂量组、高剂量组、对照组心电图改变所占比例组间均无显著性差异(P＞0.05)。
　　(2)各组大鼠动作电位结果:与假手术组比较，模型组大鼠和各给药大鼠APD50、APD90均缩短(p＜0.05)，APA减小(p＜0.05)，MAP的VMAx减小(p＜0.05)，差异具有统计学意义(P＜0.01，或P＜0.05)。与模型组比较，高剂量组、中剂量组及对照组大鼠APD50、 APD90、 ERP延长，差异具有统计学意义(P＜0.01，或P＜0.05);低剂量组大鼠心室肌的APD50、 APD90、 ERP有一定的延长，但与模型组差异无统计学意义(P＞0.05);与低剂量组比较，高、中剂量组、对照组APD50、 APD90、ERP显著延长，差异有统计学意义(P＜0.05);高剂量组、中剂量组、对照组APD50、 APD90、 ERP组间两两比较，均无显著性差异(P＞0.05)。APA:与假手术组比较，模型组及各给药组大鼠APA有一定程度增加(P＜0.05)，但组间差异无显著性(P＞0.05)。VMAx:与假手术组比较，模型组、各给药组大鼠VMAx显著增加，且各组间比较差异有显著性(p＜0.05)。
　　(3)各组大鼠血清电解质的变化:与假手术组比较，模型组及各给药组大鼠电解质Na+、CL-明显降低，以Na+降低为主，差异有显著性(P＜0.01);与模型组比较，各给药组大鼠电解质Na+、CL-降低幅度减小，差异有统计学意义(P＜0.05);与低剂量组比较，高、中剂量组及对照组大鼠电解质降低幅度减小，差异有统计学意义(P＜0.05);高剂量组、中剂量组、对照组Na+、CL-组间两两比较，均无显著性差异(P＞0.05);K+:与假手术组比较，模型组、各给药组大鼠降低，但各组间比较无统计学意义(P＞0.05)
　　(4)心肌坏死标记物检测:与假手术组比较，模型组及各给药各组大鼠心肌坏死标记物升高，差异有显著性(P＜0.01)。与模型组比较，各给药组大鼠心肌标记物明显降低，差异有显著性(P＜0.01，或P＜0.05);与低剂量组比较，高、中剂量组及对照组大鼠，心肌坏死标记物均降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，高剂量组、中剂量组、对照组心肌坏死标记物组间两两比较，均无显著性差异(P＞0.05)。
　　(5)各组大鼠脑NPY蛋白含量检测结果:与假手术组比较，模型组和各给药组大鼠脑NPY蛋白含量明显升高，差异有显著性(P＜0.01);与模型组比较，各给药组大鼠脑NPY蛋白含量检测明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01，或P＜0.05）;与低剂量组比较，高、中剂量组及对照组大鼠脑NPY含量检测降低，差异有统计学意义(P＜0.05);两两比较高剂量组、中剂量组、对照组大鼠脑NPY含量，均无显著性差异(P＞0.05)
　　结论:(1)脑梗死大鼠并发脑心综合征主要表现为心电图的异常，且多种异常心电图表现可并存。以术后24h-48h时间段发生为主。模型大鼠心室肌动作电位的APD50、APD90缩短（p＜0.05），APA减小(p＜0.05)，MAP的VMAx减小。
　　(2)心安颗粒对模型大鼠心室肌的APD50、 APD90有延长作用，对心室肌的APA、MAP的VMAX显著增加;可降低模型大鼠脑NPY含量。
　　(3)脑心综合征的发生机制可能与脑NPY含量升高、心肌细胞损伤、电解质紊乱有关。
　　(4)心安颗粒可减轻脑心综合征大鼠心电图的异常发生率，对心肌细胞其保护作用;存在一定的量效关系。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验动物

2 主要实验试剂及药品

3 主要实验仪器

4 实验方法

5 统计学方法

结果

1 整个试验期间死亡大鼠情况分析

2 各组大鼠一般情况观察和心电图的变化

3 各组大鼠术前、术后血清钠离子浓度比较

3 各组大鼠术前、术后血清钾离子浓度比较

4 各组大鼠术前、术后血清氯离子浓度比较

5 各组大鼠术前、术后血清CK-MB浓度比较

6 各组大鼠术前、术后血清cTnI浓度比较

7 不同时间点各组大鼠心电图异常情况的比较

8 各组大鼠心室肌MAP相关指标比较

9 各组大鼠大脑NPY蛋白含量的比较

讨论

1．中医药对脑心综合征的认识

2．西医对脑心综合征的认识

3．模型的选择及评价

4．脑心综合征与心肌细胞动作电位、离子电流关系

4．心安颗粒的组方中主要药物的功效分析及现代药理作用探讨

5 心安颗粒对脑心综合征治疗的可能机制

结论

不足与展望

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

脑心综合征的研究进展 综述

声明