细粒棘球蚴B抗原对1型糖尿病牙龈IL-2、IL-4表达产生的影响

摘要

目的：
　　研究EgAgB（Echincoccocus granulosus Antigen B,细粒棘球蚴B抗原）对STZ（streptozotocin,链脲佐菌素）诱导的T1DM（Type1 diabetes mellitus,1型糖尿病）模型小鼠牙龈组织中IL-2（白细胞介素-2）以及IL-4（白细胞介素-4）基因表达产生的影响，为今后进一步研究EgAgB在T1DM免疫应答机制中所起的作用,以及运用免疫疗法治疗T1DM中的牙龈炎症提供实验依据。
　　方法：
　　20只雌性小鼠按50mg/kg/d的剂量连续5天腹腔注射STZ制备小鼠T1DM模型,血糖值超过16.7mmol/L且次日复测仍为此水平，提示小鼠T1DM模型造模成功（20只小鼠两次血糖监测均超过16.7mmol/L）,按每组10只分为2组，处理组给予浓度为0.54mg/L的EgAgB100μg/10g连续5天腹腔注射，对照组给予同等剂量生理盐水腹腔注射，40周末采用颈椎脱臼法处死小鼠并取其牙龈，用Trizol一步法提取牙龈组织总RNA，逆转录（RT）反应制备cDNA，行FQ—PCR（Fluoresconce quantitative polymerase chain reaction，荧光定量聚合酶链反应），检测牙龈中IL-2mRNA、IL-4mRNA基因在处理组和对照组间表达的变化。结果：采用SPSS17.0统计软件包进行统计分析结果提示：IL-2 mRNA在EgAgB处理组表达量显著低于对照组中的表达量（P＜0.05）；IL-4 mRNA在EgAgB处理组表达量显著高于对照组中的表达量（P＜0.05）。
　　结论：
　　EgAgB可使T1DM模型小鼠牙龈中IL-2 mRNA表达降低，IL-4 mRNA表达升高，EgAgB可使牙龈Th1/Th2细胞产生的细胞因子比值改变，倾向于病理免疫相关的Th2方向，可影响T1DM牙龈中的免疫应答机制。

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前言

材料与方法

1 材料

1.1 实验动物

1.2 试剂

1.3 引物的设计与合成

1.4 实验仪器

2 方法

2.1 实验分组

2.2 样本的收集与保存

2.3 总 RNA的提取

2.4 cDNA的制备

2.5 PCR扩增

2.6 凝胶电泳分析及切胶回收

2.7 FQ—PCR

3 统计学处理

结果

1 PCR扩增产物的鉴定

2 线性范围与特异性

3 FQ—PCR检测结果

讨论

11型糖尿病发病的免疫机制

2 EgAgB对免疫应答机制的影响

3 T1DM对牙龈组织造成损伤的免疫机制的研究

4 EgAgB对STZ诱导的T1DM模型小鼠牙龈组织中IL-2以及IL-4基因表达产生的影响，及EgAgB对T1DM牙龈组织免疫应答机制产生影响的分析

小结

致谢

参考文献

综述

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