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喀什市3~5岁维吾尔族儿童菌斑生物膜中不同基因型白色念珠菌的致龋性研究

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前言

研究内容与方法

1 主要仪器和试剂

2 研究方法

3 质量控制

4 统计方法

结果

1 维吾尔族、汉族儿童菌斑中白色念珠菌的分布

2 白色念珠菌的培养鉴定

3 白色念珠菌的基因分型

4 白色念珠菌的产酸耐酸能力

5 白色念珠菌的黏附能力

6 白色念珠菌分泌性天冬氨酸蛋白酶活性

7 荧光定量检测SAP1-5在ECC组与CF组中的表达

8 析因分析比较不同基因型白色念珠菌的致龋性

讨论

1 白色念珠菌在维吾尔族、汉族儿童菌斑生物膜中的分布

2 白色念珠菌的产酸耐酸能力

3 白色念珠菌黏附能力及分泌性天冬氨酸蛋白酶

4 白色念珠菌的基因分型

5 展望

小结

致谢

参考文献

综述:白色念珠菌与婴幼儿龋的相关性研究进展

攻读硕士学位期间发表的学术论文

导师评阅表

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摘要

目的:通过研究分析新疆喀什市3~5岁儿童口腔牙菌斑生物膜中白色念珠菌的分布与低龄儿童龋病的相关性,及白色念珠菌的基因多态性与致龋能力的相关关系,为阐明白色念珠菌在龋病发生、发展过程中的作用奠定基础,为新疆喀什市3~5岁儿童龋病的防治提供理论依据。
  方法:对经过分离纯化鉴定的白色念珠菌菌株进行25SrDNA-PCR法基因分型;检测白色念珠菌的产酸耐酸及黏附能力、分泌型天冬氨酸蛋白酶活性及天冬氨酸蛋白酶基因SAP1,2,3,4,5在维吾尔族龋病组与无龋组中的表达差异。
  结果:1)白色念珠菌与低龄儿童龋病的相关性具有统计学意义;2)维吾尔族与汉族有龋儿童白色念珠菌基因型均以A型为主导,维吾尔族无龋组以C型为主导;3)白色念珠菌的产酸耐酸能力有龋组大于无龋组(P=0.004)。在 PH值为4.0和4.5时,有龋组的产酸耐酸能力较无龋组强(P<0.05);4)低龄儿童龋病组白色念珠菌玻壁黏附比率高于无龋组(P=0.02);5)全部白色念珠菌菌株均表现为天冬氨酸蛋白酶阳性,且有龋组的天冬氨酸蛋白酶水平高于无龋组(P=0.000;P=0.000)。有龋组的SAP2和SAP5的表达量显著高于无龋组(P=0.000,P=0.001);6)析因分析得到在葡萄糖浓度为0.1mol/L时有龋组与无龋组中三种基因型白色念珠菌产酸能力差异有统计学意义(分组P=0.020,基因型P=0.019),有龋组中A>C>B,无龋组中B>A>C。不同基因型白色念珠菌的SAP2在有龋与无龋组中的表达有差异(分组P=0.001,基因型P=0.020),SAP2在有龋组中A>B>C;在无龋组中B>A>C。 结论:1)低龄儿童龋病组白色念珠菌较无龋组具有更强的产酸耐酸能力;2)白色念珠菌分泌性天冬氨酸蛋白酶阳性及SAP2,SAP5的高表达可能与低龄儿童龋病的发生具有相关性;3)白色念珠菌与低龄儿童龋病的发生密切相关,且A型基因携带者可能更易患龋,不同基因型致龋能力不同,可能由于宿主环境的不同使得白色念珠菌出现了选择性生长,具体机制还有待于进一步研究。

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