新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子表达的实验研究

摘要

目的：（1）观察药物干预对新疆哈萨克族高血压病患者外周血 T淋巴细胞体外培养增殖的抑制作用。（2）研究新疆哈萨克族高血压病患者外周血 T淋巴细胞是否表达钙调磷酸酶/活化的T细胞核因子（CaN/NFAT）信号通路相关分子及其水平变化。（3）探讨ARB类降压药物替米沙坦对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子表达的影响。从而为高血压病炎症学说提供理论依据，为高血压病发病机制的探讨提供新思路，为高血压病的治疗开辟新靶点。
　　方法：（1）收集未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者90例，男女各半，随机分为空白对照组、替米沙坦组、钾通道阻滞剂组（4-AP组）共三组，每组30例，男女各半。运用免疫磁珠技术分离其外周血 T淋巴细胞进行体外培养并加入药物干预，采用CCK法分析检测药物处理0h、24h、48h、72h后T淋巴细胞增殖的变化。（2）随机选取未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者30例，男女各半，作为高血压组，同样方法随机选取相同时期30例新疆哈萨克族健康体检者，男女各半，作为正常对照组。采集两组受试者的外周静脉血，运用免疫磁珠技术筛选 T淋巴细胞，分别采用 RT-PCR和 Western blot技术检测 T淋巴细胞中NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白表达及水平变化。（3）随机选取未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压病患者100例，男女各半，随机分为空白对照组、替米沙坦组、CaN阻滞剂组（CsA组）、NFAT阻滞剂组（VIVIT组）和4-AP组共五组，每组20例，男女各半。运用免疫磁珠技术分离各组患者外周血 T淋巴细胞进行体外培养活化增殖，给予相应处理后继续培养72h。分别采用 RT-PCR和Western blot技术检测T淋巴细胞中NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白表达及水平变化。
　　结果：（1）在不同处理条件下，T淋巴细胞的增殖情况表现各不相同。各组间T淋巴细胞的增殖差异均有统计学意义（P<0.01）。同一时间点上各组间两两比较，显示替米沙坦组和4-AP组T淋巴细胞增殖后的细胞活性较空白对照组均明显减少（均P<0.01）。同一组内不同时间点两两比较，显示各组的每一时间点T淋巴细胞增殖后的细胞活性差异均有统计学意义（均P<0.01）。随着时间延长，空白对照组细胞活性逐渐增强，替米沙坦组和4-AP组逐渐减弱（均P<0.01）。替米沙坦和4-AP可以抑制T淋巴细胞的增殖，而且在72h内的抑制作用成时间依赖性。（2）两组受试者基线资料的差异无统计学意义（P>0.05），同正常对照组相比，高血压组外周血 T淋巴细胞表达 CaN/NFAT信号通路关键因子 NFATc1、IL-6和TNF-α，且高血压组的mRNA相对表达量均高于正常对照组，三者的蛋白表达量也较正常对照组增高（均 P<0.05）。（3）五组受试者基线资料的差异无统计学意义（P>0.05），NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白在各组中均有表达，替米沙坦组、CsA组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞活化增殖后NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白表达较空白对照组均明显降低（均 P<0.05），CsA组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白表达均低于替米沙坦组（均P<0.05），CsA组、VIVIT组和4-AP组T淋巴细胞NFATc1、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白表达无显著差异（P>0.05）。
　　结论：（1）替米沙坦对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞的活化增殖有明显的抑制作用，并且其作用在一定的干预时间内呈时间依赖性。说明替米沙坦可以通过抑制T淋巴细胞的增殖发挥调节高血压炎症的作用。（2）新疆哈萨克族高血压病患者外周血 T淋巴细胞上表达CaN/NFAT信号通路的相关分子，并且该通路的相关分子在外周血T淋巴细胞上表达明显增多，初步说明CaN/NFAT信号通路可能与高血压病存在一定的相关性。（3）替米沙坦能有效抑制高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子的表达，提示替米沙坦具有抗高血压炎症的作用。

目录

声明

中英文缩略词对照表

前言

第一部分 新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞体外培养增殖及药物干预的实验研究

1 研究内容与方法

2 结 果

3 讨 论

4 小 结

第二部分 CaN/NFAT信号通路相关分子在新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞中的表达

1 研究内容与方法

2 结 果

3 讨 论

4 小 结

第三部分 替米沙坦对新疆哈萨克族高血压病患者外周血T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路相关分子表达的干预研究

1 研究内容与方法

2 结 果

3 讨 论

4 小 结

结论

致谢

参考文献

综述:T淋巴细胞CaN/NFAT信号通路与心血管疾病的研究进展

攻读博士学位期间获得的学术成果

个人简历

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