Tat蛋白对马传染性贫血病毒长末端重复序列启动子活性的影响

摘要

马传染性贫血病毒(equineinfectiousanemiavirus，EIAV)属于反转录病毒科慢病毒属，是马传染性贫血(equineinfectiousanemia，EIA，简称马传贫)的病原体。我国的马传贫驴白细胞弱毒疫苗，是迄今为止世界上唯一投入应用的慢病毒疫苗，应用该疫苗成功地控制了我国马传贫的流行，同时该疫苗也是研究慢病毒免疫预防非常有价值的模型。反转录病毒前病毒基因组长末端重复序列(LTR)对病毒复制有重要的调控作用，影响到病毒的复制动力学、细胞嗜性、致病力等方面。 马传染性贫血病毒弱毒疫苗株在培育过程中LTR发生了两处稳定突变，分别是Tat反式激活区域(Tatactivatingregion，TAR)的起始碱基G到A和poly(A)附加位点C到A的突变。本研究将EIAV强毒力毒株、白细胞弱毒(EIAV-DLA)、驴胎皮肤细胞弱毒(EIAV-FDD)的LTR，以及TAR起始碱基、poly(A)附加位点突变的LTR分别克隆到pCAT3-basic质粒中，获得位于报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)上游的不同LTR重组质粒。同时将马传贫病毒反式激活蛋白Tat克隆于真核表达载体pCDNA3.1(+)，获得了Tat蛋白的表达。将Tat表达质粒分别与不同LTR克隆共转染驴胎皮肤细胞，考察Tat对LTR启动子活性的增强作用。研究发现，在皮肤细胞中Tat蛋白可以特异性增强来源于皮肤细胞弱毒疫苗LTR的启动子活性，而对白细胞源性LTR无明显增强作用。TAR起始位点和poly(A)的单碱基突变和联合突变对Tat的反式激活作用并无明显影响，提示TAR茎环结构的起始位点单碱基突变不能影响与Tat相互作用。

目录

文摘

英文文摘

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第一章文献综述

第二章研究报告Tat蛋白对马传贫病毒长末端重复序列启动子活性的影响

参考文献

致谢

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