新疆不同动物源大肠杆菌耐药性调查及其相关耐药基因检测

摘要

为了调查新疆不同动物源分离的大肠杆菌对临床常用β-内酰胺类和氨基糖苷类抗菌药物的耐药情况，采用微量肉汤稀释法，分别对新疆猪源、羊源和牛源大肠杆菌测定最小抑菌浓度。结果显示:(1)猪源大肠杆菌分离率为83.6％(454/543)，对5种抗菌药物的耐药率从高到低依次为:氨苄西林67.0％、阿莫西林/克拉维酸63.7％、安普霉素35.7％、阿米卡星19.8％、头孢噻呋10.4％;以1-4耐为主，占83.3％。(2)羊源大肠杆菌分离率为81.8％(638/780)，对5种抗菌药物的耐药率从高到低依次为:安普霉素33.9％、阿莫西林/克拉维酸21.2％、阿米卡星15.5％、氨苄西林14.1％、头孢噻呋8.8％;以1-3耐为主，占62.5％。(3)牛源大肠杆菌分离率为98.9％(89/90)，对6种抗菌药物的耐药率从高到低依次为:氨苄西林24.4％、阿莫西林/克拉维酸8.9％、头孢噻呋6.7％、庆大霉素4.4％、阿米卡星2.2％、安普霉素1.1％;以1-2耐为主，占31.1％。
　　通过PCR方法对上述203株猪源、168株羊源和32株牛源β-内酰胺类耐药大肠杆菌，进行主要的β-内酰胺酶基因检测，同时检测PMQR因子和16S rRNA甲基化酶基因。结果显示:(1)猪源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶基因为blaTEM(40.89％，83/203)和blaCTX-M(0.99％，2/203)基因;携带的PMQR因子为qnrS(2.47％，5/203)和aac(6')-Ib-cr(2.47％，5/203)基因;携带的16S rRNA甲基化酶基因为rmtB(0.99％，2/203)基因;2株菌同时携带blaTEM和rmtB基因;2株菌同时携带blaTEM和qnrS基因;2株菌同时携带blTEM和aac(6')-Ib-cr基因。(2)羊源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶基因为blaTEM(42.26％，71/168)和blaCTX-M(2.98％，5/168)基因;携带的PMQR因子为qnrS(2.38％，4/168)、aac(6')-Ib-cr(16.07％，27/168)和qepA(0.60％，1/168)基因;携带的16S rRNA甲基化酶基因为rmtB(4.17％，7/168)基因;7株菌同时携带blaTEM和rmtB基因;3株菌同时携带blaTEM和blaCTX-M基因;3株菌同时携带blaTEM和qnrS基因;12株菌同时携带blaTEM和aac(6')-Ib-cr基因;1株菌同时携带blaTEM、aac(6')-Ib-cr和qepA基因。(3)牛源大肠杆菌携带的β-内酰胺酶基因为blaTEM(15.63％，5/32)基因;携带的PMQR因子为qnrS(3.13％，1/32)和aac(6')-Ib-cr(3.13％，1/32)基因;携带的16S rRNA甲基化酶基因为rmtB(50.00％，16/32)基因;4株菌同时携带blaTEM和rmtB;1株菌同时携带blaTEM、rmtB、qnrS和aac(6')-Ib-cr基因。
　　新疆不同动物源大肠杆菌对临床常用β-内酰胺类及氨基糖苷类药物存在不同程度的耐药。猪源大肠杆菌耐药最严重，羊源次之，牛源大肠杆菌最敏感。各动物源β-内酰胺类耐药大肠杆菌中存在β-内酰胺酶基因介导的细菌耐药，均以blaTEM基因为主，且存在与PMQR因子及16S sRNA甲基化酶耐药基因共存现象。

目录

声明

论文说明

摘要

英文缩略表

第一章 绪论

1．1 国内外研究现状

1．1．1 大肠杆菌概述及其耐药现状

1．1．2 β-内酰胺酶研究进展

1．1．3 β-内酰胺酶基因及耐药特点

1．1．4 β-内酰胺酶基因与其他耐药基因的共存现状

1．2 本研究的目的及意义

1．3 研究内容

1．3．1 养殖场用药调研及对临床常用β-内酰胺类和氨基糖苷类耐药情况调查

1．3．2 不同动物源耐药基因流行情况调查

第二章 新疆不同动物源大肠杆菌对临床常用β-内酰胺类及氨基糖苷类药物耐药性调查

2．1 材料与方法

2．1．1 材料

2．1．2 方法

2．2 结果

2．2．1 细菌的分离鉴定结果

2．2．2 药敏实验结果

2．3 讨论

2．3．1 猪源大肠杆菌对5种抗菌药物耐药性分析

2．3．2 羊源大肠杆菌对5种抗菌药物耐药性分析

2．3．3 牛源大肠杆菌对6种抗苗药物耐药性分析

2．3．4 新疆不同动物源大肠杆菌耐药情况比较及分析

2．3．5 建议

2．4 本章小结

第3章 不同动物源β-内酰胺类耐药大肠杆菌相关耐药基因检测

3．1 材料与方法

3．1．1 材料

3．1．2 方法

3．2 结果

3．2．1 β-内酰胺酶检测情况

3．2．2 PMQR因子检测情况

3．2．3 16S rRNA甲基化酶检测情况

3．2．4 部分阳性菌株测序结果

3．2．5 耐药基因与耐药表型间的关系

3．3 讨论

3．3．1 不同养殖场β-内酰胺酶基因流行情况

3．3．2 不同养殖场PMQR因子和16S rRNA甲基化酶基因流行情况

3．3．3 耐药基因共存情况

3．3．4 耐药表型与耐药基因之间的关系

3．4 本章小结

第四章 结论

参考文献

附录

致谢

个人简历