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光谱法研究抗生素与金属离子对血清白蛋白的相互作用

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摘要

第1章 引言

1.1 论文研究的目的和意义

1.2 血清白蛋白

1.2.1 血清白蛋白结构

1.2.2 血清白蛋白的生理功能

1.3 生物体内的金属离子与蛋白质的作用

1.4 头孢拉定与头孢呋辛酯

1.5 血清白蛋白与小分子相互作用的研究方法

1.5.1 紫外光谱法

1.5.2 荧光光谱法研究血清白蛋白与药物结合

1.5.3 圆二色光谱法

1.5.4 电化学方法

1.5.5 傅里叶红外光谱法

1.5.6 化学计量学

1.5.7 原子作用力显微技术

1.6 研究内容

1.6.1 牛血清白蛋白与金属离子的相互作用

1.6.2 抗生素与金属离子对人血清白蛋白的相互作用

第2章 金属离子与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究

2.1 材料与方法

2.1.1 仪器及药品

2.1.2 溶液配制

2.1.3 实验过程

2.2 结果与讨论

2.2.1 紫外光谱法

2.2.2 荧光光谱法

2.3 小结

第3章 金属离子及抗生素与人血清白蛋白相互干扰作用的光谱学研究

3.1 材料与方法

3.1.1 仪器及药品

3.1.2 溶液配制

3.1.3 实验过程

3.2 结果及分析

3.2.1 药物干扰金属离子—HSA体系的紫外吸收光谱

3.2.2 金属离子干扰药物与HSA体系的紫外吸收光谱

3.2.3 药物干扰金属离子—HSA体系的荧光光谱结果

3.2.4 金属离子干扰药物与HSA体系的荧光光谱结果

3.3 讨论

3.4 小结

参考文献

致谢

作者简历

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摘要

将金属离子加入到BSA中,得到金属离子—BSA体系,测得其紫外吸收光谱图和荧光光谱图,得到金属与BSA相互作用的结果。Cu2+、Zn2+、Ag+能与BSA较好的结合,而Ca2+、Mn2+不能结合,Hg+结合较弱。Cu2+、Ag+、Hg2+出现了明显的荧光猝灭现象,Kd值分别为1.978×10-3 mol·L-1、1.061×103 mol·L-1、2.058×103 mol·L-1。
  将金属离子加入到HSA中,得到金属离子—HSA体系的紫外光谱图,在该体系中继续逐量加入药物,得到药物干扰金属离子与HSA体系的紫外光谱图。结果表明头孢拉定干扰了Cu2+与HSA体系,但对Ag+与HSA体系的干扰弱于对Cu2+体系的干扰,头孢拉定与HSA的结合能力强于金属离子与HSA的结合能力。头孢呋辛酯与HSA结合能力也大于金属离子Cu2+、Ag+与HAS的结合力。
  测得头孢药物与HSA的相互作用光谱图,向药物和HSA体系中加入金属离子,测得金属离子干扰药物—HSA体系的紫外光谱。结果表明Cu2+加强了头孢拉定对HSA的作用,Cu2+的加入对头孢呋辛酯的影响不大;Ag+加强了头孢拉定对HSA的作用,也增强了头孢呋辛酯与HSA的结合。
  将金属离子依次加入到纯的HSA中,在得到金属离子与HSA的荧光光谱后,再向该体系加入药物,测得药物离子干扰金属离子与HSA体系的荧光猝灭光谱图。Cu2+对HSA的荧光猝灭是静态猝灭,Kd=2.443×10-4 mol·L-1,KS=4.092×103 L·mol-1。加入头孢拉定后,猝灭类型为静态猝灭,Kd=3.493×10-6 mol·L-1,则KS=2.862×105 L·mol-1。加入头孢呋辛酯后,Kd=3.389×10-6mol·L-1,KS=2.951×104L·mol-1。Ag+与HSA的猝灭作用为静态猝灭,Kd=6.360×102 mol·L-1,KS=1.572×10-6 L·mol-1。加入头孢拉定后Kd=1.387×10-5mol·L-1,KS=8.781×103 L·mol-1。加入头孢呋辛酯后,Kd=2.496×10-5 mol·L-1,则KS=4.006×104 L·mol-1。
  将药物依次加入到纯的HSA中,在得到药物与HSA的荧光光谱后,再向该体系加入金属离子,测得金属离子干扰药物与HSA体系的荧光猝灭光谱图。头孢拉定对HSA的荧光猝灭是以静态猝灭为主,Kd=9.394×10-3 mol·L-1,KS=1.065×104 L·mol-1。加入Cu2+后,Kd=7.584×10-5 mol·L-1,KS=1.319×104L·mol-1。加入Ag+后,Kd=7.706×10-5 mol·L-1,KS=1.297×104 L·mol-1。头孢呋辛酯对HSA的荧光猝灭主要是静态猝灭,Kd=6.606×10-5 mol·L-1,KS=1.514×104 L·mol-1。加入Cu2+后,Kd=3.019×10-5 mol·L-1,KS=3.312×104 L·mol-1。加入Ag+后,Kd=2.172×10-5 mol·L-1,KS=4.604×104 L·mol-1。

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