莲蓬壳自由基清除能力及对细胞氧化损伤保护作用的研究

摘要

自由基为人体正常代谢产物，当机体受到紫外线照射、化学污染等外界刺激后，机体内抗氧化体系失衡，进而导致核酸、线粒体等细胞器受损，机体出现病变。莲蓬壳为睡莲科多年生草本植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)的干燥成熟花托，主要用于止血抑菌、保护心肌等。本试验以莲蓬壳为试验材料，探究莲蓬壳清除自由基能力及对氧化损伤细胞的保护作用。主要包括莲蓬壳总黄酮提取条件的优化、莲蓬壳中活性物质的筛选、鉴定活性物质的结构及活性物质对过氧化氢损伤细胞的保护作用。
　　研究结果如下:
　　(1)将莲蓬壳总黄酮提取率作为指标，研究了超声提取时间、提取温度、液料比及乙醇体积分数对总黄酮提取率的影响。采用响应面分析法优化得到最佳工艺条件:液料比40 mL/g，乙醇体积分数为48％，提取温度60℃，提取时间10min。
　　(2)以清除自由基能力为指标，考察了莲蓬壳不同极性部位的抗氧化能力。结果表明，莲蓬壳不同极性部位均具有剂量依赖性抗氧化作用，其中以中等极性乙酸乙酯活性最强。
　　(3)采用制备型高效液相、电喷雾质谱仪以核磁共振方法新型检测手段对莲蓬壳乙酸乙酯部位的活性物质进行结构鉴定。与相关文献对比，确定此物质为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside)。
　　(4)分子模拟结果初步表明，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(QOG)可能通过抑制NF-κβ的活化途径对H2O2诱导损伤CCD-986sk细胞起到保护作用。

目录

声明

论文说明

摘要

第1章 绪论

1．1 莲蓬壳的研究概况

1．1．1 莲蓬壳化学成分研究

1．1．2 莲蓬壳药理研究

1．2 黄酮类化合物研究现状

1．2．1 莲蓬壳中黄酮类化合物提取方法

1．2．2 黄酮类化合物的生理活性研究

1．3 天然产物抗氧化损伤的研究进展

1．3．1 活性氧与氧化损伤

1．3．2 活性氧与细胞凋亡

1．3．3 活性氧引起DNA和线粒体损伤

1．3．4 具有氧化损伤保护作用的天然产物

1．4 本文研究的目的及意义

1．4．1 本论文的研究目的

1．4．2 本论文的研究意义

第2章 莲蓬壳总黄酮超声提取及其抗氧化活性的研究

2．1 材料与方法

2．1．1 原料与仪器

2．1．2 主要仪器

2．1．3 试验设计与方法

2．2 结果与分析

2．2．1 单因素对莲蓬壳总黄酮提取得率的影响

2．2．2 响应面试验

2．2．3 抗氧化试验

2．2．4 对H2O2诱导损伤人皮肤CCD-986sk细胞保护作用

2．2．5 莲蓬壳营养素含量测定

2．3 讨论

2．4 本章小结

第3章 莲蓬壳不同萃取部位的生物活性研究

3．1 材料与方法

3．1．1 原料与仪器

3．1．2 主要仪器

3．1．3 试验方法

3．2 结果与分析

3．2．1 莲蓬壳不同极性部位总黄酮、多酚含量测定

3．2．2 莲蓬壳不同极性部位抗氧化作用

3．2．3 抗乳腺癌细胞试验

3．3 讨论

3．4 本章小结

第4章 莲蓬壳中活性物质化学成分的研究

4．1 材料与方法

4．1．1 原料与仪器

4．1．2 主要仪器

4．1．3 试验方法

4．2 结果与分析

4．2．1 结构鉴定

4．3 讨论

4．4 本章小结

第5章 莲蓬壳中活性物质对过氧化氢损伤CCD-986sk细胞的保护作用

5．1 材料与方法

5．1．1 原料与仪器

5．1．2 主要仪器

5．1．3 试验方法

5．2 结果与分析

5．2．1 QOG对CCD-986sk细胞存活率的影响

5．2．2 H2O2诱导CCD-986sk细胞氧化损伤的浓度筛选

5．2．3 QOG对H2O2诱导CCD-986sk细胞存活率的影响

5．2．4 QOG对H2O2损伤CCD-986sk细胞氧化指标的影响

5．2．5 QOG对H2O2损伤CCD-986sk细胞ROS含量的影响

5．2．6 分子模拟评价

5．3 讨论

5．4 本章小结

第6章 结论与展望

6．1 结论

6．2 本课题创新点

6．3 展望

参考文献

致谢

作者简介