CD40L、ICAM-1及TG在糖尿病并下肢溃疡大鼠中的意义研究

摘要

目的：复制糖尿病大鼠模型及糖尿病下肢溃疡大鼠模型，研究白细胞表面分化抗原40配体（CD40L）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及甘油三酯（TG）在糖尿病并下肢溃疡大鼠发病中的作用，并探讨CD40L、ICAM-1及TG三者之间的相互关系。 方法：造模组雄性SD大鼠禁食不禁水12小时后，腹腔注射中等剂量链脲佐菌素（STZ，45mg/kg体重），同时给予高糖高脂饮食诱导，建立糖尿病大鼠模型，腹腔注射STZ72小时后所有大鼠禁食不禁水6小时后断尾取血，罗氏血糖仪测血糖，血糖在12.5～25mmol/L之间者视为糖尿病大鼠模型造模成功；八周末，溃疡对照组组和糖尿病并溃疡组大鼠下肢备皮、涂抹冰醋酸建立糖尿病并下肢溃疡大鼠模型，每日观察溃疡变化；12周末所有大鼠禁食不禁水12小时后，测体重、断尾取血血糖仪测空腹血糖并内眦取血约4ml离心取血浆，-70℃冰箱冻存；处死大鼠，取溃疡边缘皮肤约5mm×5mm，对照组选取同一部位同一面积皮肤，福尔马林固定，48小时内送病理科脱水石蜡包埋。血浆采用放免法测空腹胰岛素水平、TG，酶联免疫吸附法测sCD40L及sICAM-1，免疫组化法测皮肤组织中的CD40L。 结果：注射STZ后糖尿病大鼠出现明显多饮、多尿、体重减轻症状，空腹胰岛素水平明显下降；糖尿病并溃疡组大鼠下肢溃疡愈合时间明显延长或不愈和（溃疡对照组溃疡愈合时间为11±1.54天，糖尿病并溃疡组愈合时间为19±1.30天，p<0.05）。糖尿病并溃疡组血TG、sCD40L及sICAM-1明显高于单纯糖尿病组、溃疡对照组及正常对照组，皮肤组织中CD40L/亦高于单纯糖尿病组、溃疡对照组及正常对照组（p<0.05）；而正常对照组与溃疡对照组各项指标无明显差异（p>0.05）；且sCD40L与sICAM-1之间呈显著正相关（p<0.05），而TG与两者之间无相关性（p>0.05）。 结论：本研究通过对正常大鼠、溃疡对照大鼠、糖尿病大鼠及糖尿病并下肢溃疡大鼠体重、下肢溃疡愈合时间、血浆sCD40L、sICAM-1、TG、空腹血糖、空腹胰岛素及皮肤组织CD40L的测定，观察到sCD40L、sICAM-1、TG及皮肤CD40L在糖尿病并下肢溃疡大鼠中明显高于糖尿病组及对照组，提示CD40L、ICAM-1、TG可能具有促进糖尿病血管病变的作用，在糖尿病溃疡的发生发展中起了重要作用。同时sCD40L与sICAM-1、sCD40L与TG、sICAM-1与TG的相关性分析得出，sCD40L与sICAM-1呈明显正相关，说明在糖尿病血管病变中两者互相促进，加速血管病变的发生，是糖尿病溃疡发生发展的危险因素；而sCD40L与TG、ICAM-1与TG之间无相关性，说明TG是糖尿病血管病变的独立危险因素。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:主要符号表

声明

前言

材料和方法

1.材料

1.1实验动物

1.2饲养条件

1.3高脂饲料的配制

1.4主要试剂及配制

1.5主要仪器及设备

2.方法

2.1 1%(10mg/ml)STZ溶液配置

2.2分组

2.3糖尿病大鼠模型的建立

2.4糖尿病大鼠模型建立成功标准

2.5糖尿病并下肢溃疡大鼠模型的建立

2.6动物处死及标本采集

2.7血液指标检测

2.8免疫组化结果判定标准

2.9统计学处理

结果

3.1大鼠一般状态

3.2溃疡情况

3.3 DU、DM、NU、NC四组间体重、血糖及造模后空腹胰岛素比较(表1)

3.4.DU、DM、NU、NC四组间TC、sICAM-1及sCD40L比较(表2)

3.5 DU、DM、NU、NC四组间皮肤组织CD40L表达水平比较(表3)

3.6 DU、DM、NU、NC四组间皮肤组织CD40L表达水平免疫组化图(图1-图5)

3.7相关性分析(图5)

讨论

结论

参考文献

文献综述:2型糖尿病下肢血管病变早期诊断的研究

致谢

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