新疆哈萨克族胃癌中抑癌基因smad4甲基化及异常表达

摘要

目的:
　　探讨新疆哈萨克族胃癌与smad4基因甲基化的关系,分析smad4蛋白失活在新疆哈萨克族胃癌发生中的作用,筛选出与该民族胃癌发生相关的smad4基因异常甲基化位点。
　　方法:
　　1.采用westernblot法检测smad4蛋白在120例组织中的表达情况。
　　2.运用MALDI-TOFMS方法检测120例组织中smad4基因启动子的甲基化状态。
　　结果:
　　1.Westernblot法检测结果:(1)与哈萨克族正常胃黏膜组织对照,哈萨克族胃癌组织中,Smad4蛋白表达明显低于哈萨克族正常胃黏膜组织(P<0.05);(2)与汉族胃癌组织对照,哈萨克族胃癌组织中,Smad4蛋白表达明显低于汉族胃癌组织(P<0.05);(3)与汉族正常胃黏膜组织对照,汉族胃癌组织中,Smad4蛋白表达明显低于汉族正常胃黏膜组织(P<0.05)。
　　2.MALDI-TOFMS方法检测甲基化结果:(1)哈萨克族胃癌组与哈萨克族正常胃黏膜组对照中,哈萨克族胃癌组Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化率明显高于哈萨克族正常胃黏膜组,Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化水平分别为38.4％和23.9%(P>0.05,差异无统计学意义);(2)汉族胃癌组与汉族正常胃黏膜组对照中,汉族胃癌组Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化率明显高于汉族正常胃黏膜组,Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化水平分别为26.5%和21.7%(P>0.05,差异无统计学意义);(3)哈萨克族胃癌组与汉族胃癌组对照中,哈萨克族胃癌组Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化率明显高于汉族胃癌组,Smad4基因启动子CpG单位平均甲基化水平分别为38.4%和26.5%(P>0.05,差异无统计学意义);(4)无论是哈萨克族还是汉族,胃癌组smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个位点的甲基化率均高于正常黏膜组,smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个CpG单位甲基化状态平均甲基化水平在哈萨克族胃癌组和哈萨克族正常对照组均为34.84%、7.87%,两者的平均甲基化水平明显高于正常对照组,CpG单位的平均甲基化率差异有统计学意义(P<0.05);(5)smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个CpG单位甲基化状态平均甲基化水平在汉族胃癌组和汉族正常对照组分别为19.18%、20.33%和10.90%和11.52%,两者的平均甲基化水平明显高于正常对照组,CpG单位的平均甲基化率差异有统计学意义(P<0.05);(6)smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个CpG单位甲基化状态平均甲基化水平在哈萨克族胃癌组和汉族胃癌组分别为34.84%、19.18%和34.84%和20.33%,哈族胃癌组平均甲基化水平明显高于汉族胃癌组,CpG单位的平均甲基化率差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论:
　　1.Smad4蛋白失活的可能是引起胃癌的发生,也可能是新疆哈萨克族胃癌高发的重要分子机制之一。
　　2.Smad4蛋白失活可能与smad4基因启动子区高甲基化改变有关。
　　3.smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个CpG单位甲基化状态的改变可能与新疆哈萨克族胃癌的发生有关。
　　4.smad4基因启动子区CpG单位3-4与CpG单位10-11这两个CpG单位甲基化状态的改变可能导致胃癌的发生。

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前言

第一章 检测胃黏膜组织DNA甲基化及蛋白表达的材料与方法

1.临床资料：

2.主要实验仪器与试剂

2.1主要仪器

2.2主要试剂

2.3主要试剂配制

3.实验方法和步骤

3.1 Westernblot法检测胃黏膜组织中smad4蛋白的表达

3.2应用MALDI-TOF MS方法检测smad4基因启动子区甲基化水平

4.统计学分析

第二章 Westernblot及甲基化检测结果

1. Westernblot法检测结果：

2.Smad4基因启动子区甲基化检测结果：

第三章 讨论

第四章 结论

参考文献

致谢

作 者 简 介