乙酰半胱氨酸对角膜新生血管形成过程中瘦素和PEDF的调节

摘要

目的：观察大鼠碱烧伤后不同时期角膜组织病理学变化，瘦素和色素上皮衍生因子的表达，以及乙酰半胱氨酸对瘦素和色素上皮衍生因子表达的影响，探讨他们与角膜新生血管（corneal neovascularization，CNV）的关系。
　　方法：使用碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管模型，采用浸润1molL-1 NaOH溶液，直径为3mm的单片滤纸，准确置于大鼠右眼角膜中央23s制作CNV模型。75只wistar大鼠，雄性，右眼为实验眼，随机分成A、B、C3组，每组25只，左眼为正常对照眼。A组自烧伤之日起每日滴注PBS液；B组每日滴注乙酰半胱氨酸5次；C组烧伤后7日之内每日滴注PBS液，第7天开始到14天每日加滴乙酰半胱氨酸5次。用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管，分别计算新生血管长度和面积，并行HE染色和免疫组织化学检测。
　　结果：碱烧伤后第4天、第7天，B组角膜新生血管生长速度低于A、C组；第11天、14天测得的角膜新生血管长度及面积，B0.05，尽管A组均值大于C组，但是差异无统计学意义。各组 PEDF表达：A组（0.3521±0.1074）；B组（0.3899±0.0721）；C组（0.3561±0.1233）。总体比较有差异（F=418.947，为P<0.05），经多重比较，A组和B组、B组和C组组间比较差异有统计学意义（均为P<0.05），B组表达高于A组、C组。A组和C组组间P>0.05，尽管A组均值小于C组，但是差异无统计学意义；伤后第14天，各组瘦素表达：A组（0.3161±0.0803）；B组（0.2504±0.1279）；C组（0.2823±0.0776）。总体比较有差异（F=651.837, P<0.05），经多重比较，各组间均为P<0.05，差异显著，BC>A。
　　结论：瘦素和PEDF表达水平与角膜新生血管的生成具有相关性，乙酰半胱氨酸能有效降低瘦素的表达，提高PEDF的表达。

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前言

技术路线图

材料与方法

1材料

1.1 实验动物

1.2 主要试剂和实验仪器

1.3 相关试剂的配制

2 实验方法

2.1 动物分组及处理

2.2 角膜新生血管模型的建立

2.3 排除标准

2.4角膜取材及标本HE染色

2.5 免疫组织化学方法检测瘦素及PEDF的表达

2.6 统计学处理

结果

1 碱烧伤后角膜新生血管的形态学观察

2 HE染色

3 瘦素、PEDF的表达及与CNV生长的相关性

讨论

结论

参考文献

附图

1 角膜HE染色图片

2 角膜切片免疫组织化学染色图片

3 角膜新生血管长度及面积统计表格

文献综述

致谢

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