激活素及其信号通路在异氟醚后处理大鼠氧糖剥夺损伤中的作用

摘要

目的：评价1.5％、3.0%以及4.5%的异氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤中的神经保护作用；探讨激活素A及其下游因子ERK1/2对异氟醚后处理对抗大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤中的保护作用。
　　方法：新生SD大鼠80只，2周龄，体重50~70g，采用随机数字表法，将其分为十组（n=8）：正常对照组（Normal组），缺氧无糖损伤组（OGD组），异氟醚后处理组（1.5%、3.0%、4.5%ISPOC组）、激活素A抑制剂组（SB431542组）ERK1/2抑制剂组（U0126组）、异氟醚后处理+抑制剂组（ISPOC+SB431542或 U0126组）、溶媒对照组（DMSO组）。抑制剂在不同异氟醚浓度组使用时间为OGD开始之前。HE染色、TTC染色以及PI染色用于测定海马脑片组织的活性。免疫荧光技术、Western blot技术以及实时荧光定量PCR技术用于检测激活素A、Smad2/3、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）、ERK1/2以及磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）蛋白以及mRNA的表达。
　　结果：与Normal组相比较，OGD组坏死神经元细胞的数量、PI染色的平均荧光强度增加，但甲瓒生成量降低、激活素A以及p-ER强度增加，但甲瓒产量、激活素A、p-Smad2/3以及p-ERK1/2蛋白表达水平以及激活素A mRNA水平有所降低。然而，4.5%ISPOC组中激活素A、p-Smad2/3以及p-ERK1/2蛋白表达水平以及激活素A mRNA水平要高于OGD组，差异具有统计学意义（P<0.05）；其他实验结果在SB431542组/U0126组与3.0%ISPOC组之间相比较，PI染色的平均荧光强度增加，而激活素A、p-Smad2/3以及K1/2蛋白的表达水平、激活素A mRNA的水平有所降低（P<0.05）；与OGD组相比较，1.5%ISPOC组和3.0%ISPOC组坏死神经元细胞的数量以及PI染色的平均荧光强度降低，但甲瓒产量、激活素A、p-Smad2/3以及p-ERK1/2蛋白表达水平以及激活素A mRNA水平显著升高（P<0.05）；4.5%ISPOC组的实验室检查结果与1.5%ISPOC、3.0%ISPOC组结果完全相反，该组中损伤神经元细胞的数量以及平均荧光p-ERK1/2蛋白表达水平降低（P<0.05）；ERK1/2在所有组之间表达没有统计学意义（p>0.05）。
　　结论：该研究证实与1.5%和4.5%异氟醚浓度相比，3.0%的异氟醚后处理能够提供更好的神经保护作用。激活素A、激活素A/Smads以及激活素A/ERK1/2信号调节通路参与了异氟醚后处理诱导的脑保护作用的机制。

目录

声明

中英文缩略词对照表

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1异氟醚后处理对大鼠氧糖剥夺损伤后海马组织CA1区神经元细胞坏死情况的影响

2 TTC染色结果

3 PI染色结果

4 激活素A及p-Smad2/3蛋白在不同浓度异氟醚后处理缺氧糖剥夺损伤后的表达

5 ERK1/2在不同浓度异氟醚后处理氧糖剥夺损伤中的作用

6 激活素A与ERK1/2蛋白在异氟醚后处理氧糖剥夺损伤后的表达变化关系

讨论

结论

参考文献

文献综述:激活素及其信号通路在缺氧缺血性脑损伤中的研究进展

致谢

作 者 简 介

导师评阅表