TGF-β1/ERK5信号通路在异氟醚后处理大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用研究

摘要

目的：观察异氟醚后处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用，以及探讨TGF-β1和ERK5在其保护机制中的作用，为异氟醚抗缺血性脑损伤的基本分子机制提供新见解。
　　方法：使用雄性SD大鼠(体重范围在50~100g)，将其麻醉后取出完整海马组织并切片，制成离体脑片。然后将脑片随机做不同分组处理，包括正常对照组、损伤组、不同浓度梯度的异氟醚后处理组、DMSO组、TGF-β1和ERK5信号蛋白阻断剂组，以及阻断剂联合异氟醚后处理组。采用TTC染色法评价各组脑片损伤程度，采用碘化丙啶染色法检测海马CA1区神经细胞死亡程度，采用免疫荧光法检测大鼠海马脑片CA1区TGF-β1的表达情况，采用qRT-PCR法从基因层次测定Smad2、Smad3和ERK5 mRNA的表达，采用Western blot法从蛋白水平检测TGF-β1、Smad2/3和ERK5信号蛋白的表达与磷酸化水平。
　　结果：与1.5％ISPOC组和4.5%ISPOC组相比，3.0%ISPOC组减轻脑片OGD损伤程度和神经细胞死亡程度最为显著，TGF-β1、p-Smad2/3和p-ERK蛋白表达明显增多（P<0.05）。与3.0%ISPOC组相比，给予TGF-β1阻断剂LY2157299、ERK5阻断剂XMD8-92后，脑片OGD损伤程度与CA1区神经细胞死亡程度显著升高（P<0.05）。免疫荧光结果显示，3.0%ISPOC组CA1区神经细胞质浆内可见明显TGF-β1表达，给予LY2157299、XMD8-92后均未见明显TGF-β1表达（P<0.05）。此外，给予LY2157299、XMD8-92后，Smad2、Smad3和ERK5 mRNA表达水平也均显著降低（P<0.05）。与3.0%ISPOC相比，给予阻断剂后相应信号蛋白表达明显降低；并且，给予 LY2157299后， p-Smad2/3、p-ERK5表达降低；给予XMD8-92后，TGF-β1、p-Smad2/3表达也明显降低（P<0.05）。
　　结论：⑴在本研究情况下，3%ISPOC对大鼠海马脑片OGD损伤具有明显神经保护作用。⑵TGF-β1/ERK5信号通路以交互对话的形式参与了异氟醚后处理的神经保护机制。

目录

声明

中英文缩略词对照表

前言

材料与方法

1 实验材料

2 方法

3 统计学方法

结果

1 不同浓度的异氟醚后处理对缺氧无糖损伤海马脑片的影响

2 信号蛋白阻断剂对异氟醚后处理缺氧无糖损伤海马脑片的影响

3 TGF-β1与ERK5在异氟醚后处理缺氧无糖损伤脑片中的表达变化关系

讨论

结论

参考文献

文献综述:TGF-β1、ERK5信号蛋白与异氟醚后处理诱导脑保护的研究进展

致谢

作 者 简 介

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