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甲基磺酸乙酯诱变加工番茄耐盐突变体耐盐基因的克隆及载体构建

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摘 要

Abstract

中英文对照表

第一章 文献综述

0前言

1 突变体库的构建

1.1自发突变

1.2 体细胞无性系的变异

1.3物理和化学方法创建突变体库

1.4插入位点变异

1.5同源重组突变法

2 突变体的选择与鉴定

3 番茄突变体库的研究进展

4 提高植物耐盐能力可能的方法

4.2耐盐品种的培育

5 本研究的技术路线及目的意义

5.1技术路线

5.2主要目的意义

第二章 甲基磺酸乙酯EMS诱导加工番茄耐盐突变体的检测

1材料与方法

1.2 试验设计

1.3 试验方法

2 结果分析

2.2 番茄突变体表型统计

雄蕊缺失:在图2-4(A)中,左边为正常花,右边为缺失雄蕊的花,在田间观察发现该植株在开花后并未结果

综上来看,在M1代诱变植株中,变异类型在番茄整个生长发育时期都有可能发生,变异涉及叶、花、果

2.3 耐盐突变体的PCR-SSCP法分子检测

3 讨论

第三章 加工番茄耐盐突变体耐盐相关基因的转录组测序分析

1材料与方法

1.1材料及处理

1.2番茄叶片转录组测序

1.3差异表达基因(DEGs)鉴定

1.4 DEGs的GO和KEGG富集分析

1.5实时荧光定量PCR (Quantitative reverse transcription P

1.6从DEGs中筛选耐盐候选基因

2结果与分析

2.1测序质量分析

2.2差异基因鉴定及分析

2.3 DEGs的GO分类和富集分析

2.4差异表达基因的KEGG代谢途径分析

2.5差异表达基因的实时荧光定量PCR (qRT-PCR)验证

2.6耐盐候选基因筛选

3讨论

第四章 耐盐候选基因的分析与克隆

1 试验材料

1.1材料与试剂

1.2 引物设计与合成

2 试验方法

2.1 试验材料的准备

2.2 总RNA的提取

2.3 cDNA第一链的获得

2.4 番茄耐盐相关基因的克隆

2.5 候选基因序列的生物信息学分析

2.6候选基因过表达载体的构建

2.7重组质粒转化农杆菌GV3101

3 结果分析

利用Trizol法提取番茄总RNA,提取本试验16份耐盐番茄材料RNA,经琼脂糖凝胶电泳检测结果如下

3.2 番茄耐盐候选基因的克隆

3.3耐盐候选基因SyGDPA1表达载体的构建

4 讨论

第五章 结论

参考文献

致 谢

作 者 简 介

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